Tet on/off鼠糧簡(jiǎn)單介紹
基于四環(huán)素誘導(dǎo)的小鼠基因表達(dá)系統(tǒng)(Tet-based)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究中。此系統(tǒng)利用多西霉素(Doxycycline,,四環(huán)素類(lèi)似物,,也稱(chēng)強(qiáng)力霉素)可逆地對(duì)目的蛋白表達(dá)進(jìn)行自由地開(kāi)和關(guān),非常方便地在小鼠任何發(fā)育階段觀察小鼠的表型變化,;而且對(duì)于基因的可控開(kāi)關(guān)還有效避免了持續(xù)表達(dá)基因引起的轉(zhuǎn)基因小鼠傳代后的基因沉默,。
目前由于多西霉素鼠糧Tet on/off鼠糧需從國(guó)外進(jìn)口,價(jià)格高周期長(zhǎng),,很多研究人員采用水中添加進(jìn)口多西霉素的方式誘導(dǎo),。但是多西霉素在水中不穩(wěn)定且需避光,需頻繁更換水,,耗費(fèi)大量人力物力,,誘導(dǎo)效果不理想,結(jié)果不穩(wěn)定,;而且由于多西霉素有苦味,,需在水中添加高濃度糖分,可能影響小鼠表型的評(píng)估。
我們采用高質(zhì)量的多西霉素,,系統(tǒng)比較了不同誘導(dǎo)濃度的效果,采用特殊的飼料加工工藝保證多西霉素活力,,zui后在Tet-based的組織特異性雙轉(zhuǎn)基因小鼠中測(cè)試飼料,,研發(fā)出誘導(dǎo)基因表達(dá)的新一代多西霉素鼠糧。除了在轉(zhuǎn)基因小鼠中使用,,該鼠糧還可以誘導(dǎo)移植到小鼠上的導(dǎo)入相關(guān)DNA元件的細(xì)胞的蛋白表達(dá),。
鼠糧為高精飼料配方,用鈷60照射殺菌,。未見(jiàn)添加的多西霉素影響小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖,。