您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
熒光酶標(biāo)儀與光吸收酶標(biāo)儀原理及區(qū)別
閱讀：10557 發(fā)布時(shí)間：2016-8-22
導(dǎo)讀：酶標(biāo)儀是構(gòu)成酶免檢驗(yàn)工作站的其中一種醫(yī)療器械,，還有一個(gè)比較重要的設(shè)備是洗板機(jī),，酶標(biāo)儀有熒光酶標(biāo)儀和光吸收酶標(biāo)儀之分，那么熒光酶標(biāo)儀原理與光吸收酶標(biāo)儀原理有什么區(qū)別呢?具體內(nèi)容如下所示：
熒光酶標(biāo)儀原理
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,，被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上,，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀,，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制，當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí),，將激發(fā)光單色器的光柵,，固定在zui適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處，而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),，將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上,，所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當(dāng)測(cè)繪熒光激發(fā)光譜時(shí),，將熒光單色器的光柵固定在zui適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL(zhǎng)處，只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),，將各波長(zhǎng)的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀,，所記錄的光譜即激發(fā)。
當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí),，將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長(zhǎng)處,，將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長(zhǎng)處,，由記錄儀得出的信號(hào)是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。
光吸收酶標(biāo)儀原理
光是電磁波,，波長(zhǎng)100nm～400nm稱(chēng)為紫外光,，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱(chēng)為紅外光,。光吸收酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,，檢測(cè)被測(cè)物吸光值。jjymafwh
光通過(guò)被檢測(cè)物,，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。
檢測(cè)單位用OD值表示,，OD是opticaldelnsity（光密度）的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,，OD=1og（1/trans）,，其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,，Ι0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度,。
OD值由下述公式計(jì)算：
E=OD=C×D×E
C為檢測(cè)物的濃度
D為檢測(cè)物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng),，在此波長(zhǎng)下，此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量,。如果選擇其它的波長(zhǎng)段,，就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,，在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，稱(chēng)為測(cè)量波長(zhǎng),。
但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收,，為了消除這種非特異性吸收，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng),，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性,。在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物光的吸收zui小,。酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。
熒光酶標(biāo)儀原理
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,，被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上,，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀,，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制，當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí),，將激發(fā)光單色器的光柵,，固定在zui適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處，而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),，將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上,，所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當(dāng)測(cè)繪熒光激發(fā)光譜時(shí),，將熒光單色器的光柵固定在zui適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL(zhǎng)處，只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),，將各波長(zhǎng)的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀,，所記錄的光譜即激發(fā)。
當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí),，將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長(zhǎng)處,，將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長(zhǎng)處,，由記錄儀得出的信號(hào)是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。
光吸收酶標(biāo)儀原理
光是電磁波,，波長(zhǎng)100nm～400nm稱(chēng)為紫外光,，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱(chēng)為紅外光,。光吸收酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,，檢測(cè)被測(cè)物吸光值。jjymafwh
光通過(guò)被檢測(cè)物,，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。
檢測(cè)單位用OD值表示,，OD是opticaldelnsity（光密度）的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,，OD=1og（1/trans）,，其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,，Ι0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度,。
OD值由下述公式計(jì)算：
E=OD=C×D×E
C為檢測(cè)物的濃度
D為檢測(cè)物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng),，在此波長(zhǎng)下，此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量,。如果選擇其它的波長(zhǎng)段,，就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,，在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，稱(chēng)為測(cè)量波長(zhǎng),。
但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收,，為了消除這種非特異性吸收，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng),，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性,。在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物光的吸收zui小,。酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。