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上海嘉鵬
主營產(chǎn)品: 超微量分光光度計,核酸蛋白檢測儀,超微量紫外分光光度計,nano光度計,超微量核酸蛋白檢測儀 |

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2016-4-14 閱讀(3691)
1.選用的瓊脂糖:不同品牌的瓊脂糖在質(zhì)量上有較大的差異,。劣質(zhì)瓊脂糖會導(dǎo)致DNA條帶模糊,,甚至條帶缺失,。因此請盡量選擇質(zhì)量穩(wěn)定可靠的品牌,。
2.選擇適當(dāng)?shù)哪z濃度:
瓊脂糖凝膠的線性DNA分辨范圍
3.凝膠制備:配制凝膠和電泳應(yīng)選用相同的1x緩沖液,;使用的容器體積至少是凝膠溶液的3倍,,以免溶液沸騰時溢出,;制膠過程中盡量趕除氣泡,;根據(jù)樣品的濃度和體積選擇適當(dāng)大小的梳子。
4.選擇適當(dāng)?shù)碾娪揪彌_液:GenStar® SD緩沖液(Cat. No. E101-50)和TBE緩沖液適用于分離比較小的DNA片段,,TAE緩沖液(Cat. No. E102-50)適用于分離比較大的DNA片段,;緩沖液應(yīng)及時更新;膠回收純化應(yīng)使用新鮮配制的1x電泳緩沖液,,以防核酸酶和DNA雜帶污染,。
5.核酸樣品的準(zhǔn)備:提取的DNA樣品應(yīng)去除蛋白和多余的鹽分等雜質(zhì);PCR樣品應(yīng)盡量在24小時內(nèi)電泳檢測,,否則條帶容易模糊,。
6.上樣緩沖液:所有泳道應(yīng)使用相同的上樣緩沖液,以防止因離子強度不同造成條帶遷移率偏差,。
7.適量上樣:上樣過多會導(dǎo)致上樣孔超載,,出現(xiàn)拖帶現(xiàn)象;上樣體積過小可能導(dǎo)致條帶亮度不均,。
8.電壓及電泳時間:根據(jù)電泳槽型號,、凝膠濃度、電泳緩沖液種類和目的條帶大小等選擇適當(dāng)?shù)碾妷汉碗娪緯r間,。使用GenStar®SD電泳緩沖液時,,電壓設(shè)置為20~35 v/cm膠長,;使用TAE或TBE緩沖液時,zui大電壓以不超過20 v/cm膠長為宜,。
上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀,、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀,、暗箱三用紫外分析儀,、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀,、三用紫外分析儀暗箱式,、紫外檢測儀、部分收集器,、恒流泵,、蠕動泵、凝膠成像系統(tǒng),、凝膠成像分析系統(tǒng),、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀,、旋渦混合器,、漩渦混合器、玻璃層析柱,、梯度混合器,、梯度混合儀、核酸蛋白檢測儀,、玻璃層析柱,、熒光增白劑測定儀、餾分收集器,、切膠儀,、藍光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品,。咨詢,。