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上海嘉鵬

主營(yíng)產(chǎn)品: 超微量分光光度計(jì),核酸蛋白檢測(cè)儀,超微量紫外分光光度計(jì),nano光度計(jì),超微量核酸蛋白檢測(cè)儀

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介紹液相色譜儀的使用方法

2016-1-4 閱讀(3412)

液相色譜儀的品牌,、種類很多,,各家的使用方法也不盡一樣,,主要看你是那一款的液相色譜儀,,當(dāng)初購(gòu)買設(shè)備時(shí),,廠家的工程師會(huì)培訓(xùn)使用方法,。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等,;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展,。

液相色譜儀的使用方法:

內(nèi)容:

1  開(kāi)機(jī)

1.1  打開(kāi)電腦。

1.2  打開(kāi)液相色譜各個(gè)模塊的電源,。

1.3  雙擊桌面“儀器—聯(lián)機(jī)",,進(jìn)入聯(lián)機(jī)界面,。

1.4  排氣:

1.4.1  手動(dòng)旋開(kāi)處沖洗閥(逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)約1圈)。
1.4.2   右鍵單擊“泵"圖標(biāo)區(qū)域,,選擇“方法…"選項(xiàng),,進(jìn)入泵編輯畫(huà)面,設(shè)流速:5ml/min(一般為3-5ml/min),,點(diǎn)擊“確定",。

1.4.3  右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“控制…"選項(xiàng),,選中“ON",,點(diǎn)擊“確定",則系統(tǒng)開(kāi)始沖洗,,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無(wú)氣泡為止,,(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,,直到所有要用通道無(wú)氣泡為止,。

1.4.4  右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),,設(shè)流速:0ml/min,,手動(dòng)旋緊沖洗閥。

1.4.5  右鍵單擊“泵"圖標(biāo),,點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),,按照方法要求選擇合適比例的流動(dòng)相,設(shè)流速:1.0ml/min,。

1.4.6  同理右鍵單擊“柱溫箱",,“檢測(cè)器"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),,按照方法的要求設(shè)置溫度,,波長(zhǎng),點(diǎn)擊“控制" 選項(xiàng),,“ON"打開(kāi)柱溫箱和檢測(cè)器,。

2  編輯方法

2.1  點(diǎn)擊“方法"-“編輯完整方法"開(kāi)始編輯完整方法。

2.2  選中除“數(shù)據(jù)分析 "外的三項(xiàng),,進(jìn)入下一選項(xiàng)卡,。

2.3  方法信息:在“方法注釋"中加入方法的信息(如:This is for test!),。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡,。

2.4  參數(shù)設(shè)定:在“流速"處輸入流量, 如1.0ml/min,,停止時(shí)間:如10 min(該停止時(shí)間僅為做一個(gè)樣品需要的時(shí)間),,按照要求選擇合適比例的流動(dòng)相配比,如乙腈:水=75:25,,A為水,,B為乙腈,則設(shè)置B:75%即可,。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡,。

2.5  自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定: 選擇“洗針進(jìn)樣"----可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置,進(jìn)入下一選項(xiàng)卡,。

2.6  柱溫箱參數(shù)設(shè)定: 在“溫度"下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,,如:40度。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡,。

2.7  UV檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定: 在“波長(zhǎng)"下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),,如254nm。點(diǎn)擊確定,。

2.8   在“ 運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表 "中,,選中“ 數(shù)據(jù)采集",點(diǎn)擊“確定",。
2.9  從“方法"菜單,,選中“方法另存為…",輸入一方法名,,如“測(cè)試",,點(diǎn)擊“確定。

3  單次采集

3.1  從“運(yùn)行控制"菜單中,,選擇“樣品信息"選項(xiàng),,選擇合適的路徑,在“數(shù)據(jù)文件"中選擇 “前綴/計(jì)數(shù)器",,輸入樣品瓶的位置,,點(diǎn)擊“確定"。

3.2 基線平穩(wěn)后約10分鐘,,從“運(yùn)行控制"菜單中選擇“運(yùn)行方法",。

4  多次數(shù)據(jù)采集

4.1  按照步驟2 編輯完整方法。

4.2  點(diǎn)擊“序列"-“序列表",,輸入“樣品瓶"“樣品名稱",,“進(jìn)樣次數(shù)",選擇合適的“做樣方法"

4.3  點(diǎn)擊“序列"-“序列參數(shù)",,選擇序列數(shù)據(jù)的保存路徑(序列會(huì)自動(dòng)生成以“序列名稱-時(shí)間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)),,數(shù)據(jù)建議以選擇 “前綴/計(jì)數(shù)器"保存。

4.4  從“序列"菜單,選中“序列另存為…",,輸入一序列名,,如“測(cè)試",點(diǎn)擊“確定,。

4.5  從“運(yùn)行控制"菜單中選擇“運(yùn)行序列",。

5  數(shù)據(jù)分析(脫機(jī)狀態(tài)使用)

5.1  雙擊“儀器 —脫機(jī)"圖標(biāo) 進(jìn)入的脫機(jī)畫(huà)面。

5.2  從“視圖"菜單中,,點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)分析"進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫(huà)面,。

5.3  從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號(hào)",選中您的數(shù)據(jù)文件名,。點(diǎn)擊“ 確定",,則數(shù)據(jù)被調(diào)出。(如預(yù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,,應(yīng)先打開(kāi)濃度較低的標(biāo)樣圖譜,。)

5.4  做譜圖優(yōu)化:從“圖形"菜單中選擇“信號(hào)選項(xiàng)"。從“范圍" 中選擇“滿量程" 或“自動(dòng)量程" 及合適的時(shí)間范圍或選擇“自定義量程" 調(diào)整,。反復(fù)進(jìn)行,,直到圖的比例合適為止。點(diǎn)擊“ 確定",。

6  積分:

6.1  從“積分"菜單中選擇“積分事件"選項(xiàng),,選擇合適的“斜率靈敏度",“峰寬",,“zui小峰面積",,“zui小峰高"。點(diǎn)擊 ,,自動(dòng)加載積分參數(shù),。

6.2  點(diǎn)擊左邊“√"圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法并退出“積分事件",。

6.3  如積分結(jié)果不理想,,則修改相應(yīng)的積分參數(shù),直到滿意為止,。

7  標(biāo)準(zhǔn)曲線

7.1  點(diǎn)擊“校正"-“校正設(shè)置",,輸入“含量單位"。

7.2  點(diǎn)擊“校正"-“新建校正表",,點(diǎn)擊確定,。輸入“化合物名稱"和“含量",點(diǎn)擊“確定",,按照提示刪除其他組分,。

7.3  至此完成單級(jí)校正,,如要增加校正級(jí)別,應(yīng)從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號(hào)",,選中您的數(shù)據(jù)文件名(第二個(gè)標(biāo)樣),,點(diǎn)擊“校正"-“添加級(jí)別",點(diǎn)擊確定,,輸入“含量",,依次增加校正級(jí)別,。

8  打印報(bào)告

8.1   從“報(bào)告"菜單中選擇“設(shè)定報(bào)告"選項(xiàng),,點(diǎn)擊“定量結(jié)果"框中“定量"右側(cè)的黑三角,選中“外標(biāo)法",,其它選項(xiàng)不變,,點(diǎn)擊“ 確定"。

8.2  從“報(bào)告"菜單中選擇“打印報(bào)告",,則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上,,如想輸出到打印機(jī)上,則點(diǎn)擊“報(bào)告" 底部的“打印"鈕,。

8.3  點(diǎn)擊“文件"-“另存為"-“方法",,把數(shù)據(jù)分析方法保存,下次分析可直接在“文件"-“調(diào)用"-“方法"下,,將該方法調(diào)出使用,。(調(diào)用的方法中含有積分方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線方法和打印報(bào)告方法)

9  關(guān)機(jī)

9.1  關(guān)機(jī)前,,先關(guān)紫外燈,,用相應(yīng)的溶劑(甲醇或乙腈)充分沖洗系統(tǒng)大約30分鐘。(色譜柱zui終應(yīng)保存在甲醇或乙腈中)

9.2  退出化學(xué)工作站,,依提示關(guān),,及其它窗口,關(guān)閉計(jì)算機(jī),。

9.3 關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開(kāi)關(guān),。

10  其它注意事項(xiàng)

10.1 當(dāng)樣品運(yùn)行時(shí),切勿打開(kāi)自動(dòng)進(jìn)樣器前遮蓋,,否則進(jìn)樣過(guò)程停止,。

10.2 系統(tǒng)發(fā)生漏液時(shí),機(jī)器會(huì)檢測(cè)到并停止進(jìn)樣,,狀態(tài)指示燈為紅色,。檢查擦干并安置好漏液處,擦干漏液傳感器,,單擊ON按鈕,,系統(tǒng)重新初始化,。

10.3 注意紫外燈使用壽命,切勿來(lái)回開(kāi)關(guān)紫外燈,。

液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分,。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問(wèn)題zui有前途的方法,。由于HPLC具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域,。

上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀,、暗箱式紫外分析儀,、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀,、手提式紫外分析儀,、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測(cè)儀,、部分收集器,、恒流泵、蠕動(dòng)泵,、凝膠成像系統(tǒng),、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),、光化學(xué)反應(yīng)儀,、旋渦混合器,、漩渦混合器、玻璃層析柱,、梯度混合器,、梯度混合儀、核酸蛋白檢測(cè)儀,、玻璃層析柱,、熒光增白劑測(cè)定儀、餾分收集器,、切膠儀,、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品,。咨詢,。

 



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