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那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于什么是凝膠電泳：

電泳是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種技術(shù),，用于根據(jù)大小分離帶電分子,，例如DNA,。

凝膠電泳是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種技術(shù),，用于分離帶電分子，例如DNA ,，RNA 和蛋白質(zhì),。根據(jù)它們的大小。

當(dāng)電流通過(guò)凝膠時(shí),，帶電分子穿過(guò)凝膠,。

在凝膠上施加電流，以使凝膠的一端帶正電荷,，而另一端帶負(fù)電荷,。

帶電分子的運(yùn)動(dòng)稱(chēng)為遷移。分子向相反電荷遷移,。因此,，帶負(fù)電荷的分子將被拉向正末端（相反的方向吸引！）,。

凝膠由可滲透的基質(zhì)（有點(diǎn)像篩子）組成,，當(dāng)電流通過(guò)時(shí)，分子可以穿過(guò)該基質(zhì),。

較小的分子在凝膠中的遷移速度更快,，因此比較大的分子遷移速度更慢，因此遷移距離更短,，因此較大的分子可以遷移,。結(jié)果，分子按大小分開(kāi),。

凝膠電泳和DNA

電泳使您能夠區(qū)分不同長(zhǎng)度的DNA片段,。

DNA帶負(fù)電，因此,，當(dāng)電流施加到凝膠上時(shí),，DNA會(huì)向帶正電的電極遷移。

較短的DNA鏈比較長(zhǎng)的DNA鏈穿過(guò)凝膠的速度更快,，從而導(dǎo)致片段按大小順序排列,。

使用染料，發(fā)熒光,？標(biāo)簽還是放射性的,？標(biāo)記使分離后的凝膠上的DNA可見(jiàn)。它們將在凝膠上顯示為條帶,。

具有已知長(zhǎng)度片段的DNA標(biāo)記通常與樣品同時(shí)在凝膠中穿行,。

通過(guò)將DNA樣品的條帶與DNA標(biāo)記的條帶進(jìn)行比較，可以算出樣品中DNA片段的大致長(zhǎng)度。

凝膠電泳如何進(jìn)行,？

準(zhǔn)備凝膠

瓊脂糖凝膠？通常用于可視化DNA片段,。用于制作凝膠的瓊脂糖濃度取決于您正在使用的DNA片段的大小,。

瓊脂糖濃度越高，基質(zhì)越致密,，反之亦然,。較小的DNA片段在較高濃度的瓊脂糖上分離，而較大的分子需要較低濃度的瓊脂糖,。

為了制備凝膠,，將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合并加熱至高溫，直到所有瓊脂糖粉融化為止,。

然后將熔化的凝膠倒入凝膠澆鑄盤(pán)中,，并在一端放置一個(gè)“梳子”，以制成用于移液的孔,。

凝膠冷卻并固化后（現(xiàn)在將是不透明而不是透明的）,，將梳子移開(kāi)。

現(xiàn)在,，許多人都使用預(yù)制的凝膠,。

然后將凝膠放入電泳槽中，并將電泳緩沖液倒入槽中,，直到覆蓋凝膠表面為止,。緩沖器傳導(dǎo)電流。所用緩沖液的類(lèi)型取決于樣品中DNA片段的大致大小,。

準(zhǔn)備用于電泳的DNA

在電泳之前將染料添加到DNA樣品中,，以增加樣品的粘度，這將防止其浮出孔,，從而可以看到樣品通過(guò)凝膠的遷移,。

將DNA標(biāo)記物（也稱(chēng)為大小標(biāo)準(zhǔn)品或DNA階梯）裝入凝膠的**個(gè)孔中。標(biāo)記中的片段長(zhǎng)度已知,，因此可用于幫助估計(jì)樣品中片段的大小,。

然后將制備的DNA樣品吸移到凝膠的其余孔中。

完成此操作后,，將蓋子放在電泳槽上,，確保凝膠以及正負(fù)電極的方向正確（我們希望DNA跨凝膠遷移至正端）。

分離碎片

然后打開(kāi)電流,，使帶負(fù)電荷的DNA穿過(guò)凝膠向凝膠的正側(cè)移動(dòng),。

較短長(zhǎng)度的DNA移動(dòng)的速度快于較長(zhǎng)長(zhǎng)度的DNA，因此在運(yùn)行電流時(shí)移動(dòng)的距離更遠(yuǎn)。

DNA遷移到凝膠中的距離可以通過(guò)監(jiān)視上樣緩沖液染料的遷移來(lái)直觀判斷,。

留下的電流要足夠長(zhǎng),，以確保DNA片段在凝膠上移動(dòng)的距離足以將它們分開(kāi)，但不要過(guò)長(zhǎng)以至于它們從凝膠末端流出,。

用于按大小分離DNA片段的DNA電泳設(shè)備插圖,。凝膠位于緩沖罐中。將DNA樣品置于凝膠一端的孔中,，并且電流流過(guò)凝膠,。帶負(fù)電荷的DNA向正電極移動(dòng)。圖片來(lái)源：Genome Research Limited

可視化結(jié)果

一旦DNA在凝膠上遷移足夠遠(yuǎn),，就將電流切斷,，并將凝膠從電泳槽中移出。

為了使DNA可視化,，用與DNA結(jié)合的熒光染料對(duì)凝膠進(jìn)行染色,，然后將其放在紫外透射儀上，該透射儀將被染色的DNA顯示為亮帶,。

或者,，染料可以在倒入之前與凝膠混合。

如果凝膠正確運(yùn)行,，將可見(jiàn)DNA標(biāo)記物/大小標(biāo)準(zhǔn)品的條帶模式,。

然后可以通過(guò)想象一條橫穿DNA標(biāo)記帶的水平線來(lái)判斷樣品中DNA的大小。然后,，您可以通過(guò)將它們與標(biāo)記中**接近的條帶進(jìn)行匹配來(lái)估計(jì)樣品中DNA的大小,。

顯示脫氧核糖核酸帶的例證在凝膠分離了。將DNA片段的長(zhǎng)度與包含已知長(zhǎng)度的片段的標(biāo)記進(jìn)行比較,。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于什么是凝膠電泳,。

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