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上海嘉鵬
主營產(chǎn)品： 超微量分光光度計,核酸蛋白檢測儀,超微量紫外分光光度計,nano光度計,超微量核酸蛋白檢測儀 |
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2021-5-18 閱讀(2979)
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于如何計算DNA片段的長度：
在測量比細(xì)胞小得多的DNA片段的長度時,，微生物學(xué)家需要技巧,，而方便的方法是凝膠電泳儀,。此方法依賴于DNA片段帶電的事實,，它是更昂貴的方法（例如X射線晶體學(xué)）的替代方法,，該方法負(fù)責(zé)發(fā)現(xiàn)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu),。
凝膠電泳的工作原理
由于DNA分子帶電,，因此會受到電流的影響,。當(dāng)您將它們放在中性凝膠中并在凝膠上通電時，分子會向正極（陽極）遷移,。因為不同大小的DNA分子帶有相同的電荷,，所以較小的分子會更快地傳播，因此此過程將分子分成多個條帶,，可以與已知大小的樣本進(jìn)行比較,。
電泳基本程序
該凝膠通常由瓊脂糖制成，瓊脂糖是一種多糖,，在緩沖溶液中加熱后會形成半固體,，微孔凝膠。在一端,，凝膠形成微小的凹痕,，稱為孔,，研究人員將研究中的DNA樣品與已知長度的參考樣品（稱為DNA階梯）放置在一起。階梯片段的長度已經(jīng)通過另一種方法例如X射線晶體學(xué)來預(yù)定,。
當(dāng)凝膠浸入導(dǎo)電溶液中并施加電壓時,，碎片開始遷移通過凝膠-先是較小的碎片，然后是較大的較慢的碎片,。它們終根據(jù)大小形成類似頻譜的波段,。
一旦發(fā)生這種情況，研究人員將關(guān)閉電源,，用DVA結(jié)合染料注入凝膠,，并在紫外線下檢查樣本。使用梯子作為參考,，研究人員可以確定可見帶中每個片段的大小,。只有條帶可見–單個DNA片段太小而看不見。
確定未知片段的長度
并非樣品中的每個譜帶都有可能與階梯上的譜帶配對,，因此,，為了確定這些未知片段的大小，科學(xué)家通常會繪制一個圖,。x軸上的是梯子中每個頻段的行進(jìn)距離（以毫米為單位）,，而y軸上的是每個頻段的大小。當(dāng)這些點通過曲線連接時,，在測量該帶行進(jìn)的距離（以毫米為單位）后,，可以從曲線中推斷出任何帶的大小。
以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于如何計算DNA片段的長度,。
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