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分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域

2021-4-29 閱讀(7430)

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域:

分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域

分子篩層析也并非一無是處,其應(yīng)用領(lǐng)域主要包括以下方面:

1)脫鹽:

高分子(如蛋白質(zhì),、核酸,、多糖等)溶液中的低分子量雜質(zhì),,可以用分子篩層析除去,,這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便,、快速,,蛋白質(zhì)和酶類等在脫鹽過程中不易失活,樣品體積可達(dá)柱床體積的25%-30%,,為了防止蛋白質(zhì)脫鹽后溶解度降低會(huì)形成沉淀吸附于柱上,,一般用醋酸銨等揮發(fā)性鹽類緩沖液使層析柱平衡,然后加入樣品,,再用同樣緩沖液洗脫,,收集的洗脫液用冷凍干燥法除去揮發(fā)性鹽類。

2)分離提純:

分子篩層析已廣泛用于酶,、蛋白質(zhì),、氨基酸、多糖,、生物堿等物質(zhì)的分離提純,。

3)測定高分子物質(zhì)的分子量:

用一系列已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)品放入同一凝膠柱內(nèi),在同一條件下層析,,記錄每一分鐘成分的洗脫體積,,并以洗脫體積對(duì)分子量的對(duì)數(shù)作圖,在一定分子量范圍內(nèi)可得一直線,,即分子量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測定未知物質(zhì)的分子量時(shí),可將此樣品加在測定了標(biāo)準(zhǔn)曲線的凝膠柱內(nèi)洗脫后,,根據(jù)物質(zhì)的洗脫體積,,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出它的分子量。

4)高分子溶液的濃縮:

通常將Sephadex G-2550干膠投入到稀的高分子溶液中,,這時(shí)水分和低分子量的物質(zhì)就會(huì)進(jìn)入凝膠粒子內(nèi)部的孔隙中,,而高分子物質(zhì)則排阻在凝膠顆粒之外,再經(jīng)離心或過濾,,將溶脹的凝膠分離出去,,就得到了濃縮的高分子溶液。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域,。

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