蛋白質(zhì)含量測定是指通過物理或化學方法對蛋白質(zhì)含量進行測定,。蛋白質(zhì)是構(gòu)成人體細胞和組織的重要成分,，蛋白質(zhì)含量測定是生物化學和分子生物學研究中常用、基本的分析方法之一,。人體正常值一般是 60～80 g/L,，準備待測蛋白質(zhì)溶液，如血清蛋白等,，用蒸餾水稀釋蛋白質(zhì)溶液,；如為固體蛋白質(zhì)，應(yīng)在105℃環(huán)境下烘干,。
蛋白質(zhì)含量測定的操作方法
1.凱氏定氮法
準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,，想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質(zhì)樣品,，另外兩個燒瓶作為對照,，在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物，再加入濃硫酸,，將4個燒瓶放到消化架上進行消化,，之后進行蒸餾，全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,，直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色,，即為滴定終點，結(jié)算出蛋白質(zhì)含量,。
2.雙縮脲法
雙縮脲法是個用比色法測定蛋白質(zhì)濃度的方法,，硫銨不干擾顯色， Cu2+與蛋白質(zhì)的肽鍵,，以及酪氨酸殘基絡(luò)合,，形成紫藍色絡(luò)合物，此物在540nm波長處有大吸收。首先利用標準蛋白溶液和雙縮脲試劑繪制標準曲線,，將待測血清與硫酸鈉在待測試管中混合,，并用只加入硫酸鈉不含血清的試管作為對照，將兩支試管加入等量的雙縮脲試劑,，充分混合后于37℃環(huán)境中放置10分鐘,，在540nm波長進行比色，以對照管調(diào)零,，讀取吸光度值,，由標準曲線上直接查出蛋白質(zhì)含量,。雙縮脲法常用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白質(zhì)溶液測定,。
3.酚試劑法
取6支試管分別標號，前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,，后一支試管加待測蛋白質(zhì)溶液,，不加標準蛋白溶液，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致,，將液體混合均勻,，在室溫下放置30分鐘，以未加蛋白質(zhì)溶液的支試管作為空白對照,，于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值
4.紫外吸收法
大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm波長處有特征的大吸收,，這是由于蛋白質(zhì)中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在,，可用于測定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白質(zhì)溶液,。取9支試管分別標號，前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,，1號試管不加標準蛋白溶液,，后一支試管加待測蛋白質(zhì)溶液，而不加標準蛋白溶液,，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致,，將液體混合均勻，在280nm波長處進行比色,，記錄吸光度值,。
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