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一站式真菌mRNAOUT | One-Stop Fungal mRNA Isolation Kit | 25次 | 常溫運輸,,4℃保存,Oligo(dT)纖維素低溫運輸,,-20℃保存,,有效期一年。 |
一站式真菌mRNAOUT產品及特點
本產品專門用于從常見的各種真菌中快速提取總RNA,,然后再用(dT)纖維素分離其中的mRNA,,提取過的真菌包括Candida albican、Saccharomyces cerevisiae,Schizosaccharomyces pombe 和Pichia pastoris,、Aspergillus flavu 等,。其操作流程如下:
的特點是:
1. 一站式操作,本試劑盒足夠50次微量真菌總RNA提取,,25次從總RNA開始的微量mRNA提取,。
2. 得到的m R N A 可直接用于R T - P C R 、N o r t h e r n 雜交,、m i c r o a r r a yhybridization,、cDNA合成等。
3. 操作比柱式法mRNA純化法更簡單,,不需要過柱,,免去很多繁瑣步驟。
4. 整個過程只需要約60分鐘,。
使用及效果
1. 用真菌RNAOUT的方法提取真菌總RNA,,將兩管收集在一起,共得到100 μL總RNA(詳見真菌RNAOUT的使用手冊),。
2. 從總RNA中純化mRNA:將0.5 mL 溶液A(結合液)加入到一管裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,,放置5分鐘后離心吸棄上清后待用。將制備的總RNA100 μL加熱到65℃ 5分鐘后加入等體積的溶液A,,轉移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,,顛倒混勻數(shù)次,離心后將上清轉移到一個離心管中,。用0.5 mL溶液A,,混勻后4℃ 200g 離心5分鐘,小心棄上清,。重復上步洗3-5次,,用DEPC水洗脫并收集mRNA。
3. 用微量核酸沉淀劑沉淀mRNA(詳見微量核酸沉淀劑使用手冊),。
注:所得mRNA只占總RNA的5%左右,,很微量很珍貴,一般不宜電泳檢測
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