一站式植物mRNAOUT產(chǎn)品及特點(diǎn)
構(gòu)建cDNA文庫,、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR方法檢測(cè)稀有的mRNA等研究常常需要從總RNA中分離mRNA,，mRNA只占總RNA的1%左右，但由于帶poly(A)尾巴,，所以可以通過與Oligo(dT)纖維素的親和結(jié)合而與其他RNA（如rRNA,、tRNA等）分離開。本產(chǎn)品專門用于從植物組織中一站式提取mRNA,，其操作如下：
具有下列特點(diǎn)：
1. 一站式,，是由天恩澤的高效、無多糖柱式植物RNA提取試劑和mRNA提取試劑兩個(gè)產(chǎn)品整合而成,，即開即用,，非常方便,。
2. 一次可以處理50-500 mg的植物組織，能得到約10-15 μ g總RNA,，從中可得0.1-0.5 μg左右的mRNA,。
3. Oligo(dT)纖維素吸附能力強(qiáng)，每克可以吸附50-80 OD的mRNA,，相當(dāng)于2000-3000 μg mRNA,。
4. mRNA提取過程操作簡(jiǎn)單，只需要離心就可以完成,，免去了常規(guī)的灌柱,、洗柱等繁瑣操作。
5. 得到的mRNA可以直接用于構(gòu)建cDNA文庫,、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR,。
使用及效果
1. 用植物RNAOUT的方法提取植物總RNA，zui后用50 μ L洗脫,，將兩管收集在一起,，共得到100 μ L總RNA（詳見柱式植物RNAOUT的使用手冊(cè)）。
2. 從總RNA中純化mRNA：將0.5 mL 溶液A（結(jié)合液）加入到一管裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,，放置5分鐘后離心吸棄上清后待用,。將制備的總RNA100 μ L加熱到65℃ 5分鐘后加入等體積的溶液A，轉(zhuǎn)移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,，顛倒混勻數(shù)次,，離心后將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)離心管中。用0.5 mL溶液A,，混勻后4℃ 200 g 離心5分鐘,，小心棄上清。重復(fù)上步洗3-5次,。用RNase-free水洗脫mRNA,。
3. 用微量核酸沉淀劑沉淀mRNA（詳見微量核酸沉淀劑使用手冊(cè)）。
注：所得mRNA只占總RNA的5%左右,，很微量很珍貴,，一般不宜電泳檢測(cè)。