一站式動物mRNAOUT產(chǎn)品及特點
構(gòu)建cDNA文庫、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR方法檢測稀有的mRNA等研究常常需要從總RNA中分離mRNA,，mRNA只占總RNA的1%左右,，但由于帶poly(A)尾巴，所以可以通過與Oligo(dT)纖維素的親和結(jié)合而與其他RNA（如rRNA,、tRNA等）分離開,。本產(chǎn)品專門用于從動物組織中提取mRNA，其操作步驟如下：
具有下列特點：
1. 一站式，由柱式動物RNA提取試劑和mRNA提取試劑兩個產(chǎn)品整合而成,，即開即用,，非常方便。
2. 一次可以處理50-100 mg的動物組織,，能得到約10-15 μ g總RNA,，從中可得0.1-0.5 μ g左右mRNA。
3. Oligo(dT)纖維素吸附能力強,，每克可以吸附50-80 OD的mRNA,，相當(dāng)于2000-3000 μ g mRNA。
4. mRNA提取過程操作簡單,，只需要離心就可以完成,，免去了常規(guī)的灌柱、洗柱等繁瑣操作,。
5. 得到的mRNA可以直接用于構(gòu)建cDNA文庫,、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR。
使用及效果
1. 用柱式動物RNAOUT的方法提取動物總RNA,，zui后用50μL洗脫,，將兩管收集在一起，共得到100μL總RNA（詳見柱式動物RNAOUT的使用手冊）,。
2. 從總RNA中純化mRNA：將0.5 mL 溶液A（結(jié)合液）加入到一管裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,，放置5分鐘后離心吸棄上清后待用。將制備的總RNA100μL加熱到65℃ 5分鐘后加入等體積的溶液A,，轉(zhuǎn)移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中,，顛倒混勻數(shù)次，離心后將上清轉(zhuǎn)移到一個離心管中,。用0.5 mL溶液A混
勻后4℃ 200 g 離心5分鐘,，小心棄上清。重復(fù)上步洗3-5次,。用DEPC水洗脫并收集mRNA,。
3. 用微量核酸沉淀劑沉淀mRNA（詳見微量核酸沉淀劑使用手冊）。
注：所得mRNA只占總RNA的5%左右,，很微量很珍貴,，一般不宜電泳檢測。