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小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)檢測試劑盒為什么實驗過程中孵育,、洗滌需要振蕩,、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分,,振蕩洗滌使背景更干凈,。建議使用酶標96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩,,可以加快,、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸,,使得反應過程更加*,OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高,;洗滌過程振蕩,,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,,同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度,具體操作請參見說明書,。
小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)檢測試劑盒何時終止ELISA反應,。
ELISA實驗zui終需要酶催化底物顯色反應來完成,在合適時間終止反應是ELISA實驗成功的重要因素,。在HRP-TMB酶促反應系統(tǒng)中,,當zui高濃度標準品顏色不再變深,倒數2-3個濃度標準品顏色開始有淺藍色時,,便需要終止反應,;或者也可以根據zui高濃度標準品孔在620nm的OD值來決定,OD620=0.9-0.95之間時即可終止,。
小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)檢測試劑盒為什么酶標儀讀數時必須選用雙波長,。
首先,酶標儀使用前務必預熱10-15min,,使測讀結果更穩(wěn)定,。其次,ELISA實驗采用雙波長測定吸光度,,可以排除單波長檢測時的測定干擾(標本的濃度,,干擾色等)。一般采用zui大波長作為參照波長,,在參照波長下,,檢測物的吸光值zui小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,;因此,,雙波長測定,可zui大限度的消除指紋,、雜質及不透光的物質對酶標儀讀數帶來的誤差,,以保證實驗數據的準確度。
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