大鼠封閉蛋白5(CLDN5)檢測(cè)試劑盒的對(duì)照說明

1.封閉時(shí)間改用37度2h，是4度24h

2.洗板改成5次以上

以上為了保證減少非特異性吸附造成的顯色，影響對(duì)結(jié)果的判斷和分析,。

結(jié)果顯示：1：10、1：100,、1：200,、1：400的陰、陽血清均隨抗原呈現(xiàn)剃度變化,。

陽性血清呈梯度變化是可以理解的,，但陰性血清不該這么明顯，原因有二：a.包被抗原量不足,，大鼠封閉蛋白5(CLDN5)檢測(cè)試劑盒封閉不夠充分,，導(dǎo)致板條仍有未封閉的位點(diǎn)，可以和酶標(biāo)抗體結(jié)合,，自然包被抗原量越多,，位點(diǎn)越少，則顯色越弱。b.陰性血清稀釋度過低,，導(dǎo)致仍存在非特異的結(jié)合,，在封閉*的情況下，要保證陰性血清OD值低,，根據(jù)具體情況可以稀釋到1000倍或以上都可以,。

抗原空白對(duì)照背景低，但一抗空白對(duì)照背景高,，甚至比陰性血清OD值高,。

這點(diǎn)用封閉不*比較好解釋，陰性血清在這里相當(dāng)于起了一個(gè)封閉作用,，酶標(biāo)抗體結(jié)合少了,，顯色自然低了。

大鼠封閉蛋白5(CLDN5)檢測(cè)試劑盒另外1：10稀釋的陰性血清和陽性血清OD值相差較大,，這與報(bào)道較多的1：100稀釋效果好有些出入,，不知是否可以用于以后檢測(cè)時(shí)的稀釋倍數(shù)？,？以上原因是否與包被抗原未進(jìn)行較高提純以及封閉有關(guān),？

OD值相差較大，但首先要看陰性對(duì)照的本底如何（較空白空如何）,？如果本底高,，是會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響的。這里需要找出稀釋度,。

大鼠封閉蛋白5(CLDN5)檢測(cè)試劑盒抗原的提純是取決于抗體特異性的,，如果所使用的為單抗，對(duì)抗原純度要求可以不高,，但是如果是多抗,，那么抗原不純將容易引起非特異性的顯色。

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