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elisa試劑盒試驗原理

時間:2017-12-25閱讀:1941
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elisa試劑盒試驗原理

elisa試劑盒運用雙抗體夾心法測定標本中大白鼠類風濕因子(RF)水平,。用純化的大白鼠類
風濕因子(RF)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次加入類風濕因子
(RF),,再與 HRP 符號的類風濕因子(RF)抗體結合,,構成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹
底洗刷后加底物 TMB 顯,。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍,,并在酸的效果下轉化成
終究的黃。彩的深淺和樣品中的類風濕因子(RF)呈正相關,。用酶標儀在 450nm 波長下
測定吸光度(OD 值),,經(jīng)過規(guī)范曲線計算樣品中大白鼠類風濕因子(RF)濃度。
elisa試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可運用,,酶標包被板開封后如未
用完,,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗刷液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗刷時不影響成果。
3.各步加樣均應運用加樣器,,并常常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內,,如標本數(shù)量多,,推薦運用排槍加樣。
4. elisa試劑盒請每次測定的同時做規(guī)范曲線,,做復孔,。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值
大于規(guī)范品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。

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