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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)如何獲得的結(jié)果
在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,加酶物,,加底物。凍住血清融解后,,蛋白質(zhì)有些濃縮,,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,,防止氣泡,,可上下倒置混和,不要在混勻器上激烈振動(dòng),。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝結(jié)、縮短后即可獲得,。也可在板孔中參加稀釋液,,再在其參加血清標(biāo)本,然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以確?;旌?。通常說(shuō)來(lái),,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測(cè)定的需低溫冰存,??捎米鱁LISA測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清 ),、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、大便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體 或抗原成份,ELISA試劑盒中本次實(shí)驗(yàn)不需用的有些應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存,。
ELISA試劑盒血清標(biāo)本可按慣例辦法收集,,應(yīng)留心防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,,溶血標(biāo)本也許會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保存過(guò)久,,其間的可發(fā)作聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深。這篇文章將敘說(shuō)板式ELISA各個(gè)操作過(guò)程的留心要點(diǎn),,珠式,、管式及磁性球ELSIA,國(guó)外試劑均與特別儀器合作使用,,嚴(yán)格遵循劃定操作,,必能得出的成果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,,防止加在孔壁上部,,并留心不行濺起,不行產(chǎn)憤慨泡,。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀的血清,,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)維修通常均用板式點(diǎn),。除特別情況外,在醫(yī)學(xué)維修中均以血清作為檢查標(biāo)本,。加酶物使用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,,使加液過(guò)程敏捷完結(jié)。如有細(xì)菌污染,,菌體中也許富含內(nèi)源性HRP,,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,,以發(fā)作穿插污染,,也可用一次性的定量塑料管加樣,。的試劑,杰出的儀器和的操作是確保ELISA試劑盒檢查成果牢靠的必要條件,。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,,包含用于洗刷的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清 ,、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物),。
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