數(shù)控固相萃取儀是由色譜柱,、高壓輸液泵,、檢測器、高壓輸液系統(tǒng)以及進(jìn)樣系統(tǒng)組成的,,是數(shù)控固相萃取儀的關(guān)鍵部件之,,用以完成流動相的輸送任務(wù)。對泵的要求是:耐腐蝕,、耐高壓,、無脈沖、輸出流量范圍寬,、流速恒定,,且泵體易于清洗和維修。高壓輸液泵可分為恒壓泵和恒流泵兩類,,常使用恒流泵(其壓力隨系統(tǒng)阻力改變而流量不變),。
數(shù)控固相萃取儀由玻璃、不銹鋼或氟塑料等耐腐蝕材料制成,。貯液罐的放置位置要高于泵體,,以保持輸液靜壓差,使用過程應(yīng)密閉,,以防止因蒸發(fā)引起流動相組成改變,,還可防止氣體進(jìn)入。在液相色譜法中主要使用紫外檢測器(UVD),,可分為固定波長,、可變波長和二管陣列檢測器三種類型,以可變波長紫外檢測器應(yīng)用廣泛,。檢測器由光源,、流通池和記錄器組成,其工作原理是進(jìn)入檢測器的組分對特定波長的紫外光能產(chǎn)生選擇性吸收,,其吸收度與濃度的關(guān)系符合光吸收定律,。
數(shù)控固相萃取儀流動相常用甲醇-水或乙腈-水為底劑的溶劑系統(tǒng)。 由貯液罐,、脫氣裝置,、高壓輸液泵、過濾器,、梯度洗脫裝置等組成,。流動相在使用前必須脫氣,否則很易在系統(tǒng)的低壓部分逸出氣泡,,氣泡的出現(xiàn)不僅影響柱分離效率,,數(shù)控固相萃取儀還會影響檢測器的靈敏度甚至不能正常工作。脫氣的方法有加熱回流法,、抽真空脫氣法,、超聲脫氣法和在線真空脫氣法等,。
數(shù)控固相萃取儀常用六通閥進(jìn)樣器進(jìn)樣,進(jìn)樣量由定量環(huán)確定,。操作時先將進(jìn)樣器手柄置于采樣位置(LOAD),,此時進(jìn)樣口只與定量環(huán)接通,處于常壓狀態(tài),,用微量注射器(體積應(yīng)大于定量環(huán)體積)注入樣品溶液,,樣品停留在定量環(huán)中。然后轉(zhuǎn)動手柄至進(jìn)樣位(INJECT),,使定量環(huán)接入輸液管路,,樣品由高壓流動相帶入色譜柱中。
數(shù)控固相萃取儀由柱管和填充劑組成,。柱管多用不銹鋼制成,。柱內(nèi)填充劑有硅膠和化學(xué)鍵合固定相。在化學(xué)鍵合固定相中有十八烷基硅烷鍵合硅膠(又稱ODS柱或C18柱),、辛烷基硅烷鍵合硅膠(C8柱),、氨基或氰基鍵合硅膠等,在中藥制劑的定量分析中,,數(shù)控固相萃取儀主要使用ODS柱,。由于ODS屬于非性固定相,在分離分析時般使用性流動相,,所以屬反相色譜法,。常用流動相有甲醇-水或乙腈-水等,洗脫時性大的組分先出柱,,性小的組分后出柱,。
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