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更新時(shí)間:2024-07-22 19:19:38瀏覽次數(shù):917次
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生殖醫(yī)學(xué)科分子遺傳實(shí)驗(yàn)室凈化裝修工程設(shè)計(jì)
出入境檢驗(yàn)檢疫生物無菌室實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)工程
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所設(shè)計(jì) 生物檢疫實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)裝修
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PCR實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)檢測無菌室規(guī)劃設(shè)計(jì)裝修工程
近年來對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視,因?yàn)樗鼘z測結(jié)果的可靠性,、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用,。
本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局,空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì),、氣流控制和污染的防制幾個(gè)方面對實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中的主要特點(diǎn)進(jìn)行了闡述,。
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。因此,,實(shí)驗(yàn)室的平面布局,、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問題進(jìn)行的,。下面就對這幾個(gè)方面分別進(jìn)行說明,。
臨床基因擴(kuò)增檢測實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū),、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配置和擴(kuò)增區(qū),、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行,,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)—標(biāo)本制備區(qū)—擴(kuò)增反應(yīng)混合物配置和擴(kuò)增區(qū)—擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,,但是為了避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),,要嚴(yán)格控制送,、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
1.試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備,、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備,。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域,。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),,并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對與氣流壓力的控制,,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求,。
2.標(biāo)本制備區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA,、DNA)提取,、儲存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)cDNA的合成。
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?,以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染,。另外,,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動,。
3.擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA或cDNA擴(kuò)增。此外,,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行,。在巢式PCR測定中,通常在di一輪擴(kuò)增后必須打開反應(yīng)管,,因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性,,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,,以避免氣溶膠在本區(qū)漏出,,為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要走動,。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行,。
4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測,,此區(qū)域可不設(shè),。
本區(qū)是主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域,。
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