那么問題來了，核酸檢測中,，應該如何建設一個標準的PCR實驗室,？PCR實驗室如何設計規(guī)劃才堪稱專業(yè)？PCR實驗室管理又有哪些注意要點,？

PCR實驗室裝修建設

標準的PCR 實驗室分為四個區(qū)域,，分別為：

n1.試劑配制區(qū),； 

n2.樣品處理區(qū)； 

n3.核酸擴增區(qū),；

n4.產(chǎn)物分析區(qū),；

如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當合并,。

（進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，例如不同的顏色,。工作人員離開各工作區(qū)域時,，不得將工作服帶出） 

【各區(qū)的功能分別為】

試劑準備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝和保存,。     

樣品處理區(qū)：樣品登記,、分裝；核酸提取,、保存和加樣,。    

擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析,、登記及報告,。  

擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開，須使用不同的房間,，兩區(qū)之間有一定的間隔,。  

使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。     

在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準備區(qū)可設在同一房間內(nèi)：    

在生物安全柜內(nèi)操作,；每個實驗人員,、實驗組分別使用各自的試劑及耗材；    

盛放污染材料的器皿密封并一次性使用,；  用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒,。

PCR實驗室裝修建設要點

1、主體結(jié)構(gòu)： 

主體為彩鋼板,、鋁合金型材,。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,，從而解決容易污染,、積塵、不易清掃等問題,。結(jié)構(gòu)牢固,，線條簡明，美觀大方，密封性好,。

2,、標準的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：

將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū),。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊,。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū)， 同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染,。

可打開緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣,，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調(diào)的回風口,，空氣通過回風口向室內(nèi)換氣,。

3,、 消毒：

在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用,。

在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū) 還設置移動紫外線燈,，對實驗桌進行局部消毒。

4,、機械連鎖不銹鋼傳遞窗：

試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞,，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染（人物分流） 

5、 地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,，整體性好,。便于進行清掃，耐腐蝕,。沒有條件的也可采用水磨石地面,，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。

6,、照明

燈具要選用凈化燈具,，能達到便于清洗、不積塵的特點,。

在建設的過程中應注意

●規(guī)范的安裝流程和全面的服務流程,。 

●嚴格按照規(guī)范科學設計的安裝流程。

●安裝前需要確定以下安裝條件,，如：電源電壓,，電源進線位置，電話網(wǎng)絡線進線位置,，進水水壓,，小安裝空間，地面平整度，通風孔,、進水管和下水管的位置等,，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風口尺寸。

PCR實驗室設計要點

PCR實驗室可以是分散形式,，也可以是組合形式,。完成一組PCR實驗，通常應經(jīng)過試劑配制,、樣品處理,、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要,，還應增加樣品粉碎過程,。

一、分散形式PCR實驗室

所謂分散形式PCR實驗室,，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室,，由于各個實驗之間不易相互干擾,，因此無需特殊條件要求。 

二,、組合形式PCR實驗室

所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,，組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室,，由于各個實驗間集中布置,，容易造成相互干擾，因此,，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求,。各室在入口處設緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換,。

環(huán)揚未來實驗室對PCR實驗室建設一些經(jīng)驗分享：

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染,；

可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果,。

核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,，可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果,。 

在理想情況下，PCR實驗室緩沖間內(nèi),，可設置正壓,，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。 PCR實驗室進風由原有中央空調(diào)控制,，要求將中央空調(diào)風口安裝到定點,，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果使用熒光PCR儀,，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并,。

若房間進深允許，可設PCR內(nèi)部走廊,。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,，緩沖間比走廊更有意義。

各個區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流,、物流,、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障,，避免實驗之間的相互干擾,，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。

實驗室的墻體,，包括頂棚,，應結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好,；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔,、不吸附,、耐腐蝕、易清洗消毒,；地面材料應滿足無縫隙,、無滲漏、光潔,、耐腐蝕的要求,。

PCR實驗室主要設備

試劑準備區(qū) 

儀器設備主要有冰箱、超凈臺,、加樣器,、混勻器、天平和離心機等,，加樣器,、天平除了要外，還應有定期校準,。   試劑分裝應在超凈臺中進行  擴增反應混合液應使用分子生物學級的,，試劑制備好后應有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測試劑的擴增效果。

標本制備區(qū) 

儀器設備主要有生物安全柜,、加樣器,、離心機、溫育儀,、混勻器等  

擴增區(qū) 

擴增區(qū)的主要儀器是核酸擴增儀,、超凈臺、微量加樣器,、離心機,、可移動紫外燈,。擴增儀需進行校準。并配備UPS電源,，以防止由于電壓的波動，停電對擴增效果的影響,。

分析區(qū) 

本區(qū)所使用的儀器設備有酶標儀,、洗板機,、加樣器和水浴箱等 潔凈實驗區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規(guī)定的。 

一些瑣碎的,、不可忽略的實驗室設計

1.實驗室空調(diào)通風系統(tǒng)設計及壓力控制 

PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,，宜采用全送全排的氣流組織形式,。同時,，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求,。

2.污染的預防與控制  

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染,。在實際工作中，常見的有以下幾種污染類型：擴增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染,；試劑的污染以及標本間的污染,。由于一旦發(fā)生污染,，實驗就必須停止,，直到找到污染源為止,，而且實驗結(jié)果必須作廢，需重新進行實驗,。所以發(fā)生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力,。因此要避免污染,，首先應是預防，而不是排除,。

PCR實驗室*的嚴格管理

（1）嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區(qū)的門,； 

（2）盡量減少在實驗區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性,。 

（3）擴增產(chǎn)物分析區(qū)是主要的擴增產(chǎn)物污染來源,，廢液不能在實驗室中傾倒,，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,，用過的吸頭等一次性材料也應經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等,； 

（4）擴增產(chǎn)物分析區(qū)可能會用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì),，應特別注意實驗人員的安全防護,。完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應的設備和儀器,，如超凈工作臺,、離心機、加樣器等,。