PCR實(shí)驗(yàn)指的是基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法,，PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,，例如：艾滋病檢測(cè)，乙型肝炎,，禽疫病,，癌基因的檢測(cè)和診斷，DNA指紋,，個(gè)體識(shí)別,，親子鑒定及法醫(yī)物證等等。華測(cè)實(shí)驗(yàn)室今天就PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),、建設(shè)要求和要點(diǎn)進(jìn)行詳解,。

　　一.PCR實(shí)驗(yàn)室布局

　　原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū),，擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域,，并設(shè)有走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置,。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,，不能直通,，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗,。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，即從：試劑準(zhǔn)備區(qū)——樣品制備區(qū)——PCR擴(kuò)增室——產(chǎn)物分析室,，不得逆向流動(dòng),。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng),。各工作區(qū)頂部應(yīng)該安裝紫外燈,，紫外燈波長(zhǎng)為254mm,每20㎡一支40W的紫外燈。

　　二.實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備

　　1. 試劑準(zhǔn)備區(qū)：主要進(jìn)行試劑的制備,，分裝和主反應(yīng)混合液的制備,。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域,。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑,。本區(qū)主要設(shè)備有天平,，冰箱，離心機(jī),，加樣器,，振蕩器等。對(duì)于氣流壓力的控制,，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求,，一般為+10Pa。

　　2. 樣品制備區(qū)：主要進(jìn)行樣品的保存,，核酸提取,，貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱,，生物安全柜，離心機(jī),，加樣器,，振蕩器等。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染,，一般為+10Pa。

　　3. 擴(kuò)增區(qū)：主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增,。此外,，已制備的DNA模板(來(lái)自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有：擴(kuò)增儀,，冰箱,，離心機(jī)，加樣器等,。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,，以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為-25Pa。

　　4. 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定,。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀,，洗板機(jī).加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,，一般為-25Pa,，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域