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奧林巴斯顯微鏡光路照明系統(tǒng)的調(diào)整有4項(xiàng)內(nèi)容

時間:2019/11/18閱讀:3059
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(1) 照明光源燈室在顯微外的初步調(diào)整
① 首先將燈室的外殼打開,,壓彈簧夾子將鹵素?zé)襞菅b入插座中,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔住),,以免燈泡上留有指紋等臟物,,影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上,,接通電源后,,用的螺絲刀調(diào)節(jié)燈的調(diào)焦旋鈕孔(標(biāo)有"←→"),使燈絲投影在1-2m外的墻上,,將燈絲成像調(diào)至清晰,;然后調(diào)節(jié)燈的高低位置調(diào)節(jié)絲孔(標(biāo)有"──"),使燈絲位置高低適當(dāng);再調(diào)節(jié)燈的左右位置調(diào)節(jié)螺絲孔(標(biāo)有"──"),,使燈絲左右位置合適,。 

2) 光源發(fā)光體(燈絲)在奧林巴斯顯微鏡內(nèi)位置的檢驗(yàn)和校正:
目的是為了把發(fā)光體的像端端正正地調(diào)入物鏡的視域范圍內(nèi),從光源的角度去確保奧林巴斯顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明,,這是調(diào)整庫勒照明系統(tǒng)的前提條件,。需要的基本工具:對中望遠(yuǎn)鏡購置奧林巴斯顯微鏡時已配備。
① 拔掉燈庫內(nèi)的毛玻璃套筒,,把燈室裝回奧林巴斯顯微鏡上,;

② 選用10×物鏡,開亮光源程序找樣品并調(diào)焦清晰,,再換用40×物鏡把樣品調(diào)焦清 晰(40×物鏡可以看清燈絲的全貌),;

③ 把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到大;
④ 拔掉其中一個目鏡,,換上對中望遠(yuǎn)鏡,,抓住白色部分,另一手伸縮黑色接目鏡,,就可在視野中看到燈絲像,;
⑤ 如燈絲位置不合適,調(diào)"──"孔,,把燈絲像沿水平方向調(diào)好,,調(diào)"──"孔,把絲像沿垂直方向調(diào)好,,直至將燈絲像調(diào)至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像,;
⑥ 調(diào)整完畢后,將毛玻璃套筒插回原位,,拔掉對中望遠(yuǎn)鏡,,換回目鏡作下一步調(diào)整。以上所述照明光源燈室在奧林巴斯顯微鏡外的調(diào)整和光源發(fā)光體在奧林巴斯顯微鏡內(nèi)位置的校驗(yàn),,只需在奧林巴斯顯微鏡初次安裝調(diào)試及更換燈泡時進(jìn)行,,平時使用奧林巴斯顯微鏡時不能隨意亂調(diào)亂動。萬一調(diào)亂時,,可按上述步驟調(diào)回原狀,。

(3) 庫勒照明(Kohler)系統(tǒng)的正確調(diào)整:

 奧林巴斯顯微鏡的正確調(diào)試,主要工作之一是照明光路系統(tǒng)的調(diào)整,,而其中的關(guān)鍵是庫勒照明系統(tǒng)的調(diào)整,。對于每一位使用奧林巴斯顯微鏡的人員,特別是作顯微照像的人員來說,,應(yīng)該對庫勒照明系統(tǒng)的原理及其調(diào)整步驟有一定的了解和掌握,,才能充分發(fā)揮奧林巴斯顯微鏡應(yīng)有的功能,拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。

庫勒照明系統(tǒng)的原理簡單來說就是:光源發(fā)光體上任意一點(diǎn)發(fā)出的光,,可以照明奧林巴斯顯微鏡的視域范圍,,而光源發(fā)光體上每一點(diǎn)所發(fā)出的光匯集起來,在奧林巴斯顯微鏡的視域中就實(shí)現(xiàn)了非常充分而又均勻的照明,。

調(diào)整庫勒照明系統(tǒng)的目的,,是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明,防止雜散光對照像系統(tǒng)造成影響或干擾,,以免照像時在底片形成灰霧,。

高調(diào)整庫勒照明系統(tǒng)的必要部件:視場光闌、可進(jìn)行合軸調(diào)整的聚光鏡系統(tǒng),。
① 選用10×物鏡和10×目鏡,;
② 把聚光鏡前端透鏡擺進(jìn)光路中,孔徑光闌調(diào)至適中的位置上(不大不小),,再把聚光鏡升到頂?shù)奈恢蒙?,聚光鏡轉(zhuǎn)盤調(diào)至明視野"J"位置;
③ 把視場光闌調(diào)至小(0,。1),;
④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,開亮光源,,調(diào)焦清晰,;
⑤ 視域中會出現(xiàn)一個局部照明的區(qū)域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,,在其中可以清晰地看到樣品的細(xì)節(jié),;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細(xì)節(jié)看得清楚,;
⑥ 把聚光鏡微微地向下調(diào),使視野中的亮斑逐漸收小,,慢慢變成一個清晰的多邊形象,,這便是視場光闌的清晰像;
⑦ 一般情況下,,多邊形象并不在視域中央,,需要調(diào)整聚光鏡的一對調(diào)中螺絲,把視場光闌多邊形的像調(diào)至中央位置,;
⑧ 逐漸開大視場光闌,,使多邊形象成為視域的內(nèi)接多邊形,進(jìn)一步核對調(diào)中的狀況,,如對中不夠理想,,繼續(xù)微微調(diào)對中螺絲;
⑨ 將視場光闌稍為再微微開大一些,使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上,,至此,,庫勒照明系統(tǒng)調(diào)整完畢。庫勒照明系統(tǒng)調(diào)整好以后,,整個視域照明均勻,,拍攝的顯微照片明亮清晰,反差正常,。

在日后使用過程中應(yīng)特別注意:

 a,。 視場光闌不可任意開大,但可隨物鏡倍數(shù)的增大而將視場光闌收小,,隨物鏡倍數(shù)的減小而開大,;

 b。 聚光鏡的高低位置不準(zhǔn)亂調(diào),,否則會破壞已調(diào)整好的庫勒照明系統(tǒng),;

 c。 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外,,使用10×或10×以上物鏡時要將前端透鏡擺入光路中,;

 d。 關(guān)于物鏡倍數(shù)與視場光闌大小配合問題,,在實(shí)際使用過程中,,作為一般觀察不一定要收小或開大視場光闌,但作顯微照相時,,為了避免雜散光線對照相系統(tǒng)的干擾,,以便能拍攝到較完善的照片,則應(yīng)在使用每一個倍數(shù)的物鏡時,,把視場光闌調(diào)節(jié)到正好消失于所觀察的視域邊上,,這是比較繁復(fù)的工作,但又非做不可,。

較為簡便的方法是把與各個倍數(shù)物鏡相對應(yīng)的視場光闌事先調(diào)整好,,并作好記號,以后使用時根據(jù)記號直接調(diào)至相應(yīng)的位置,。

(4) 孔徑光闌的正確使用: 
由于聚光鏡的孔徑光闌可以影響奧林巴斯顯微鏡的分辨率,,使用時應(yīng)掌握正確的使用方法。

過去由于對孔徑光闌的認(rèn)識不足,,往往把它當(dāng)作是調(diào)節(jié)視野亮度的工具,。雖然調(diào)節(jié)孔徑光闌在一定程度上可以改變視野的亮度,但會直接影響成像的反差,、對比度及分辨率,,在使用過程中應(yīng)盡可能避免,。為了發(fā)揮聚光鏡孔徑光闌的作用,以便在觀察時,,尤其在作顯微照相時獲得分辨率,,在每換用一個倍數(shù)的物鏡時,在樣品調(diào)焦清晰后,,需要調(diào)節(jié)孔徑光闌,,使它的大小正好等于所用物鏡數(shù)值孔徑(物鏡孔徑像)的2/3。

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