NEST 801007 爬片 24孔 適用于細(xì)胞培養(yǎng)板 100個(gè)/包

上海點(diǎn)睿儀器儀表有限公司一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品渠道商和技術(shù)服務(wù)商,。公司由幾位海外留學(xué)多年的回國人員，于2011年3月創(chuàng)立,，2013年銷售額突破2000萬元,。公司致力于向客戶提供*的產(chǎn)品、*化的解決方案和高品質(zhì)的專業(yè)服務(wù),，并承擔(dān)起生物科學(xué)產(chǎn)業(yè)助推器的歷史使命,，服務(wù)并推動(dòng)生命科學(xué)事業(yè)的發(fā)展。優(yōu)秀的員工,、科學(xué)的管理,、高效的營運(yùn)、全面的信息網(wǎng)絡(luò),、雄厚的資金,、多年的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)和進(jìn)步的經(jīng)營理念，是我們服務(wù)于客戶,、奉獻(xiàn)于社會,、實(shí)現(xiàn)歷史使命的基礎(chǔ)和保證。

公司價(jià)值觀——成就客戶,、創(chuàng)新為要,、誠信負(fù)責(zé)

公司自主研發(fā)了程序降溫盒，不銹鋼試管架,，太空鋁制架,，在市場中得到了熱捧！客戶反饋特別好,！

公司同時(shí)也是生產(chǎn)了恒溫金屬加熱器,，金屬浴，性價(jià)高,！

常規(guī)類耗材代理了,，CKSLAB ,NEST，巴羅克,，axygen,corning,nunc,nalgene,等等,。

NEST 801007 爬片 24孔 適用于細(xì)胞培養(yǎng)板 100個(gè)/包

商品名稱：爬片

商品貨號：801007

品牌：耐思  NEST

規(guī)格：100個(gè)/包

一,、爬片的準(zhǔn)備

        1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片,；本公司*的爬片不防一試,，適合多種細(xì)胞的爬片。

        2.應(yīng)用蓋玻片,，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小,，以備置于6孔板、12孔板或24孔板,；裁剪時(shí)可用前護(hù)士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪,，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后,，稍用力一掰就分開了。 如果接種大皿的話,，我一般不將蓋玻片切開,，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時(shí)再將之切開,，這樣既保證了細(xì)胞均一性,，又可同時(shí)做幾個(gè)指標(biāo)的染色。

        3.將剪裁好的爬片,，置于濃硫酸中浸泡并guoye,，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時(shí),，再用三蒸水沖洗3遍（個(gè)人認(rèn)為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了,，如果不干凈的話，細(xì)胞帖壁不好）,，放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進(jìn)行高壓消毒,。

        4.高壓后取出放入烤箱中烤干，備用,?？靖珊罂煞湃氤瑑襞_中。

        5.關(guān)于多聚賴氨酸,，很多人都將玻片用此處理,，以使細(xì)胞與玻片結(jié)合更牢。但我在做爬片時(shí)從來沒用過多聚賴氨酸,，細(xì)胞貼壁仍然很好,，且在做后續(xù)的免疫細(xì)胞化學(xué)染色、TUNEL等凋亡檢測,、免疫熒光等也從未脫過片,。

  二,、細(xì)胞爬片

        1.胰酶消化細(xì)胞后計(jì)數(shù)重懸細(xì)胞于*培養(yǎng)基中。

        2.加細(xì)胞時(shí),，根據(jù)玻片的大小,，先在每個(gè)孔里準(zhǔn)備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基，目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,，然后放玻片,，防止加細(xì)胞懸液時(shí)玻片漂起，造成雙層細(xì)胞貼片,。整個(gè)過程注意無菌操作,。

        3.根據(jù)自己的需要選擇合適的細(xì)胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可

        4.待細(xì)胞貼壁后，可去上清加含藥培養(yǎng)基,。

        5.按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),，作用一定時(shí)間后取玻片。取玻片時(shí)由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊,，張力較大,，我一般將注射器針頭針尖向背面弄個(gè)小鉤，這樣將爬片輕輕勾起,，用小鑷子取出就可以了,。如果要做諸如24h，48h,，72h等這樣時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)的話,，將所需數(shù)量的爬片取出時(shí)應(yīng)用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng),。

 三,、細(xì)胞爬片的固定

          細(xì)胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍,，然后再做固定,。當(dāng)然，根據(jù)研究目的,，PBS洗也不是一定要做的,，比如做凋亡的TUNEL染色時(shí)就避免洗，因?yàn)榈蛲龅募?xì)胞在洗的過程中有可能會脫落,。

         另外在保存細(xì)胞爬片的時(shí)候,，我一般用培養(yǎng)皿或板，先在皿底放一層面巾紙,，然后再放爬片,，這樣方便做實(shí)驗(yàn)時(shí)取片。然后蓋上蓋子，并在蓋子上做標(biāo)記,，為避免混淆,，可用透明膠帶將蓋子和皿連在一起。一般-20℃保存2-3個(gè)月的片子做免疫組化是沒有問題的,。