厭氧培養(yǎng)箱操作規(guī)范
1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋,。
2 通電源開照明燈,，開控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度,。
3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉),。
4 關緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗,。
5 操作室內(nèi)*次置換（氮氣置換）：
?。?）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋,。
?。?）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥,，使二只塑料袋充足氮氣,，然后扎緊袋口。
?。?）厭氧培養(yǎng)箱把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。
（4）把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),，至全部放出,。
6 操作室第二次置換（氮氣置換）重復一 次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7 操作室第三次置換（混合氣體置換）：
?。ɑ旌蠚怏w配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）
?。?）調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣,。
?。?）混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣直通閥（三通閥）,，使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計,，流量為每分鐘10毫升左右。
?。?）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi),。
（4）通過三次換氣后,，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。
8 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，厭氧培養(yǎng)箱接通除氧催化器電源進行催化除氧,，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況,，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。
9 開紫外線滅菌燈,，室內(nèi)進行滅菌處理,。滅菌時間自定。
二,、菌種的置入和培養(yǎng)
1 檢查取樣室內(nèi)門并關緊之,。
2 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門,。
3 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作,。
4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5 取樣室內(nèi)外門開啟,，關緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗及幫助操作,。
6 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件：
（1）每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,，正常情況下使用,。如不正常就必須重新?lián)Q氣。
?。?）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,，使補進的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
?。?）連續(xù)培養(yǎng)運行一 天，更換一 次除氧劑和干燥劑,。
7 接種棒滅菌器的應用：
?。?）隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）
（2）熔蠟處可直接放上,，試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟,。
8 操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制,。
9 厭氧培養(yǎng)箱混合氣瓶,、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力為0.1Mpa左右,。
