生物制品是制藥工業(yè)的一部分，對生產(chǎn)廠房有很高的潔凈要求，尤其是活jun,、活疫苗的生產(chǎn)中,，經(jīng)常受到不同程度的污染,，因此，不僅需要重視潔凈室的建立,，更要重視質(zhì)量控制方法及標(biāo)準(zhǔn),。

朝鮮戰(zhàn)爭中，美國發(fā)現(xiàn)大量電子儀器失靈,，后找到了主要原因,，是灰塵在作怪，促成了潔 凈技術(shù)的起步,。1961年,，誕生了世界上早的潔凈室標(biāo)準(zhǔn),，1966年，頒布了修訂后209A,， 時(shí)至1992年,，建立了迄今被廣泛采用的209E。上為了加強(qiáng)藥品,、生物制品質(zhì)量管理規(guī)范 (GMP),，把潔凈室定為的生產(chǎn)硬件之一。GMP對廠房,、設(shè)備等,，明確規(guī)定了相應(yīng)的潔凈要 求，并制訂了有關(guān)標(biāo)準(zhǔn),。

1　潔凈室的污染源

潔凈室污染源按性質(zhì)可分物理,、化學(xué)、生物等,。直徑在0.001-1000μm的固態(tài),、液態(tài)或二者的混合物質(zhì)，包括生物粒子和非生物粒子,，我們稱為懸浮粒子,。微生物一般以無生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠形式存在于空氣中,，1μm以下者永外懸浮,，10μm以上者會(huì)逐漸沉下來而形成菌塵。潔凈室污染可分為外部污染和內(nèi)部污染,。外部污染指大氣塵污染,，可以通過光電法測得。內(nèi)部污染,，是由人和有關(guān)的物品,、設(shè)備 等引起的。人是潔凈室大的污染源,，占90%左右,。人和環(huán)境造成了潔凈室的污染，所以在潔凈室中,，人的數(shù)量和活動(dòng)應(yīng)有特別嚴(yán)格的限制,。　　

2　潔凈室質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

表1　世界主要國家潔凈室標(biāo)準(zhǔn)(潔凈度)

潔凈室是指空氣潔凈度達(dá)到規(guī)定要求的可供人類工作的場所 ,，其功能是控制微粒的污染 ,。一般按用途可分為：1.工業(yè)潔凈室，以無生命的微粒為控制對象;2.生物潔凈室，主要控制微生物對工作對象的污染,。

3　潔凈室質(zhì)控的檢測方法及討論[8]

3.1　塵埃粒子　由于空氣中存在大量塵埃粒子,，而微生物大多依附于這些塵埃粒子隨空氣流動(dòng)造成污染。制 藥工業(yè)用多種方法獲得無菌狀態(tài),，過濾法以其捕集率高,，又經(jīng)濟(jì)而被廣泛使用。其中,，特別應(yīng)該提到的是采用了HEPA(High Eicienoy Particulate Air)過濾器,，對0.3μm以上空氣粒子捕集率高達(dá)99.97%以上，除濾過病du外,，空氣中所有微生物顆?？杀粸V除。因此,， 正常潔凈室是無菌的,，但是，由于人,、物,、環(huán)境等污染因素，潔凈室往往受到不同程度 污染,。因此,，我們多采用激光塵埃粒子計(jì)數(shù)且進(jìn)行監(jiān)控,。標(biāo)準(zhǔn)見表2,。

表2　外有關(guān)懸浮粒子的測定標(biāo)準(zhǔn)(塵粒數(shù)/m3)

3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子。應(yīng)用細(xì)菌采樣器抽取一定量的空氣 使其滯留在培養(yǎng)基上,，經(jīng)過培養(yǎng)計(jì)數(shù)菌落數(shù),。20世紀(jì)30年代，英國研制porton液體采樣器,，美 國研制了AGI液體采樣器,。1941年，Bourdion使用裂縫式采樣器,，成為空氣微生物采樣測定的開端,。1956年，報(bào)道了六級篩孔撞擊式采樣器,，1958年A.A.Andersn對其加以改進(jìn)并 定型生產(chǎn),，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器（蘇州宏瑞FSC-A6)。它由頂罩,、6節(jié)篩板,、3個(gè)彈簧及抽氣 孔和動(dòng)力裝置構(gòu)成。由于它采集粒譜廣 、效率高,、生物失活率低等原因而廣泛使用至今,。空氣微生物采樣器一般分為七大類：液體式,、固體式,、沉降式、離心式,、光散射式和大容量式,。本文將對離心式空氣微生物采樣器(R CS)作詳細(xì)討論?？諝馕⑸餃y試標(biāo)準(zhǔn)見表3,。

表3　外有關(guān)空氣微生物的測定標(biāo)準(zhǔn)(CFU/m3)

3.3　表面微生物　為了檢測潔凈室中墻壁、地板,、儀器表面,、桌面、門把等帶菌情況,，通常選用接觸壓印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法,。需要時(shí) ，還可與過濾裝置相結(jié)合來完成棉拭采樣,。1941年,，Walter和Hvcker報(bào)道了COntact瓊脂平板方法，以后,，Angelotti和Fotert等作了進(jìn)一步的工作,。帶菌狀況都有要求，歐共體GMP( 草案)規(guī)定,，100級：平均菌落數(shù)不可過5 個(gè);1000級：25個(gè);100000級：50個(gè),。表面微生物的檢測，越來越受到人們的重視,。

3.4　關(guān)于沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock創(chuàng)立,。依靠空氣中的粒子自然沉降于瓊脂平板上的這種采集方法，由于粒子沉降 的速率很慢,，如需采集到有效數(shù)量的粒子,，就需暴露很長時(shí)間。但因空氣中的致bing菌數(shù)量是很少的,，金黃色菌菌球jun在病房空氣中平均每140升才有一個(gè)活菌粒子,，為了彌補(bǔ)這個(gè)缺陷，曾采用直徑為14公分的大平皿,，以增加瓊脂的暴lu面積,。Harding和Williams還曾用 一種多層平板的方法來進(jìn)一步暴露面積,，每層放一個(gè)14公分直徑的平板，但結(jié)果不堪滿意,。

由于潔凈室已濾除了大部分大顆粒,，一般用此法是無意義的。但是,，人為,、環(huán)境和潔凈裝置 故障等原因引起的較大顆粒污染以及沉降平板采樣潔的簡便，可作為日常監(jiān)測潔凈室水平的 一種參考方法,。

3.5　關(guān)于RCS[9]　離心式空氣采樣器被介紹作為一種在使用的檢 測空氣微生物的儀器,，由于它輕便，無噪音而廣泛使用,，并擴(kuò)展到制藥工業(yè)等領(lǐng)域,。RCS通 過離心收集顆粒，為制藥工業(yè)所接受,，因?yàn)樗坪醴螰DA所描述的“Active”采樣儀器,。Gre-schel等認(rèn)為它相當(dāng)有效，Macher等則持反對意見,。多年來,，許多者了帶菌顆粒的大小，結(jié)論是：5-15μm,，中等粒是13μm,，而4μm以下很少。這些結(jié)果是從,、手shu室,、辦公室、實(shí)驗(yàn)室和制藥無菌室所獲得,。他們認(rèn)為,，如果顆粒大小是已知的,，RCS可定 量測定細(xì)jun濃度,，但是，目前這些顆粒大小是未知的,，故不能把它視為定量采樣器,，只能歸于沉降平皿一樣的類型。