色譜柱的使用和保養(yǎng)
色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件,，被測(cè)物質(zhì)能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性的作用,。因此,，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng),，以延長色譜柱的使用壽命,。
1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱,。預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間,，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了*的平衡，并防止了對(duì)柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱,。保護(hù)柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱,，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換,，而不需要經(jīng)常更換色譜柱,，這就延長了色譜柱的使用壽命。
2,、防止氣體進(jìn)入色譜柱,。有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì)使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室,。因此,，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過脫氣的流動(dòng)相,，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來安裝色譜柱,。a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出,；b.如有溶劑滲出,，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入,；c.如無溶劑滲出時(shí),，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí),，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上,，以流動(dòng)相來反方向沖洗色譜柱，以便將柱內(nèi)的空氣排除,。較好以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱,，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì)導(dǎo)致柱性能的降低；d.如果流出的溶劑里不含有氣泡,，說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了,，再將色譜柱以正確的方向接好,，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
3,、色譜柱的清洗,。為了不使被測(cè)物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后,，都應(yīng)及時(shí)地清洗色譜柱,。首先要用對(duì)被測(cè)樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來洗脫色譜柱，如果流動(dòng)相是緩沖溶液,，則應(yīng)先用蒸餾水來沖洗色譜柱,，以沖掉柱內(nèi)的鹽，然后再用合適的溶劑來沖洗,。
凝膠濾過色譜法(GelFiltrationChromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動(dòng)相,，用完之后當(dāng)然要用蒸餾水來沖洗。如果是連續(xù)操作,，可以將緩沖溶液置于柱內(nèi)過夜,，但較好是維持小流速(<0.5ml/min)以防止緩沖鹽的析出，如果流動(dòng)相中含有鹵化物,，即使是停一夜,，也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈，以防止它們對(duì)柱體的腐蝕,。
4,、色譜柱的存放。如果色譜柱暫時(shí)不用,，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：
a.幾天之內(nèi)的短期放置,，應(yīng)先用溶劑沖洗好色譜柱(如凝膠柱則用蒸餾水來沖洗)，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可,。
b.如果色譜柱長期不用,，僅用上述方法來處理就不行了，這時(shí)應(yīng)使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱,，反相柱一般使用甲醇,，正相柱則可用正已烷或庚烷，而凝膠柱則不能用水了,，因柱內(nèi)如果有微生物的生長則會(huì)使柱效降低,，此時(shí)應(yīng)用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴(yán),。色譜柱長期放置時(shí),，一定要將色譜柱的兩端封嚴(yán),，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象,，因這可導(dǎo)致柱效的嚴(yán)重降低,。
c.色譜柱應(yīng)貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里,，柱內(nèi)就會(huì)結(jié)冰,，這也將導(dǎo)致柱效的降低。
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