“ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快速檢測系統(tǒng)”簡稱“BL細(xì)菌快檢儀”,,由試劑組、微量熒光檢測儀,、樣品預(yù)處理耗材三部件組成。它是由本公司依據(jù)螢火蟲發(fā)光原理研制,;經(jīng)國家有關(guān)部門鑒定,;關(guān)鍵試劑、組成部件均立足于國內(nèi),;具有自主知識產(chǎn)權(quán),;與美、英,、日同類產(chǎn)品性能相同,,價格只及其一半的款國產(chǎn)細(xì)菌快檢設(shè)備??捎糜跈z測食品,、飲料、原料乳中的細(xì)菌總數(shù),,也可供上述生產(chǎn)企業(yè)及檢疫,、環(huán)保、水政、海關(guān)等單位衛(wèi)生監(jiān)控使用,,1-5分鐘即能提供實時檢測數(shù)據(jù),,并具備準(zhǔn)確、便攜,、操作容易等特點,。 螢火蟲會發(fā)光是由于它能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;螢火蟲熒光素酶(簡稱蟲光素酶,luciferase),、蟲熒光素(D-luciferin),、以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)--三磷酸腺苷(ATP)。在有氧的條件下,,蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應(yīng)形成氧化熒光素并發(fā)出熒光,, 只要具備適當(dāng)條件,不僅螢火蟲,,即使在試管中也能發(fā)出熒光,。在一個反應(yīng)系統(tǒng)中,當(dāng)蟲光素酶和蟲熒光素處于過量的情況下,,熒光的強弱取決于ATP的數(shù)量,。因此,以檢測含細(xì)菌的樣品為例,,細(xì)菌細(xì)胞越多,,ATP量越高,發(fā)出的熒光也就越強,。由于蟲光素酶對ATP的反應(yīng)非常靈敏,,熒光強弱可以通過熒光儀計量。所以,,在排除樣品中非細(xì)菌ATP的干擾情況下,,通過熒光值就能確定樣品中細(xì)菌ATP的含量,通過相對熒光值和細(xì)菌細(xì)胞數(shù)的關(guān)系曲線,,就能快速確定樣品中細(xì)菌的細(xì)胞數(shù),。 應(yīng)用領(lǐng)域及優(yōu)特點 “快檢系統(tǒng)”可供食品、飲料,、乳品加工生產(chǎn)的全程監(jiān)測,,以及環(huán)保、水政,、海關(guān)檢疫等執(zhí)法部門快速檢測各種樣品中的微生物(細(xì)菌總數(shù)),。表1、2分別列出使用“快檢系統(tǒng)” 實施全程監(jiān)控過程及“快檢系統(tǒng)”和“常規(guī)平皿計數(shù)”方法的差別和利弊,。 ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快速檢測系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo) 序號 | 項目名稱 | 標(biāo) 準(zhǔn) | 1 | 檢測特性 | 分度裂解及0.45μm過濾,去除非細(xì)菌細(xì)胞的干擾 | 2 | 實際檢測靈敏度(菌落數(shù)) | 100cfu/ml(1cfu/ml使用濃縮器) | 3 | 量程范圍 | 0--1010cfu/ml | 4 | 實際檢測靈敏度(ATP) | 5×10-18mol | 5 | 本底計數(shù)率(s-1) | ≤50 | 6 | 與平皿計數(shù)相關(guān)性 | 98% | 7 | 8小時工作不穩(wěn)定性 | ≤5% | 8 | 重復(fù)性(批間差) | ≤3% | 9 | 環(huán)境溫度 | 5-30℃ | 10 | 檢測器特性 | 光電倍增管及光子計數(shù)采樣模塊 | 11 | 供電電源 | ~220V 50Hz可使用充電電池 | 12 | 機身尺寸 | 160×105×50mm |
使用BL細(xì)菌快檢儀實施食品,、飲料、乳品加工等全程衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測 生產(chǎn)程序 | 監(jiān)測內(nèi)容 | 加工生產(chǎn)前 | 生產(chǎn)設(shè)施清潔、消毒效果檢測,,原,、輔料細(xì)菌總數(shù)檢測,以保障原料質(zhì)量或明確原料品質(zhì)級別,。 | 加工生產(chǎn)過程中 加工生產(chǎn)后 廢棄物排放,、環(huán)境、人員 | 生產(chǎn)設(shè)備關(guān)鍵控制點(例如供水,、通風(fēng)閥門)衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測,,影響乳品發(fā)酵飲料、酒類特殊微生物總數(shù)檢測,。 制成品污染細(xì)菌總數(shù)檢測,。 衛(wèi)生學(xué)及細(xì)菌總數(shù)檢測。 |
兩種微生物(細(xì)菌總數(shù))檢測方法的差別和利弊比較 | ATP熒光快檢 | 常規(guī)平皿計數(shù) | 可檢范圍 獲得結(jié)果的時間 操作繁簡 結(jié)果的效應(yīng) | 所有細(xì)菌,、真菌,、藻類 1-5分鐘即得實時結(jié)果 簡單,步驟少 快速,、預(yù)警,、溯源 | 只能檢出可在特定培養(yǎng)基上生長的微生物(常用LB瓊脂皿只檢出需氧細(xì)菌) 需要多種特定培養(yǎng)基,需1-5天 煩瑣,、步驟多,、人為影響因素多 滯后、檢出結(jié)果保留時間長,,有利于進(jìn)一步化驗 |
故障排除 故障 | 可能原因 | 排除方法 | 在無過濾比色杯或樣品情況下,,可拉動抽屜推入后,仍顯示高背景讀數(shù) | 1,、抽屜被樣品污染 2,、高濕度影響設(shè)備 3、光敏部件有誤 | 1,、用酒精擦抽屜去除污染 2,、重新使用前在干燥情況下放置24小時 3,、更換或檢修測光儀 | 有樣品的可拉動抽屜推入后無讀數(shù) | 1,、電池電量不足 2、直流電源接觸不良 3,、斷電 4,、可拉動抽屜關(guān)閉不嚴(yán) | 1、如顯示電池電量不足,,可更換電池或改用直流電源 2,、檢查和改善接觸 3、查對供電情況 4、重新關(guān)閉抽屜 | 給出的讀數(shù)顯著低于應(yīng)有讀數(shù) | 1,、可拉動抽屜不干凈 2,、濕度高 3、加入LLR試劑組后沒有立即關(guān)閉抽屜讀數(shù) 4,、樣品經(jīng)冷凍或冷藏后使其中的細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)ATP量顯著降低 | 1,、擦凈可拉動抽屜 2、使用前在干燥情況下放置24小時 3,、更換樣品,,重新試驗讀數(shù) 4、待樣品及試劑恢復(fù)到室溫后再測定 |
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