“ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快速檢測(cè)系統(tǒng)”簡(jiǎn)稱(chēng)“BL細(xì)菌快檢儀”,,由試劑組,、微量熒光檢測(cè)儀、樣品預(yù)處理耗材三部件組成,。它是由本公司依據(jù)螢火蟲(chóng)發(fā)光原理研制,;經(jīng)國(guó)家有關(guān)部門(mén)鑒定;關(guān)鍵試劑,、組成部件均立足于國(guó)內(nèi),;具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán);與美,、英,、日同類(lèi)產(chǎn)品性能相同,價(jià)格只及其一半的款國(guó)產(chǎn)細(xì)菌快檢設(shè)備,??捎糜跈z測(cè)食品、飲料,、原料乳中的細(xì)菌總數(shù),,也可供上述生產(chǎn)企業(yè)及檢疫、環(huán)保、水政,、海關(guān)等單位衛(wèi)生監(jiān)控使用,,1-5分鐘即能提供實(shí)時(shí)檢測(cè)數(shù)據(jù),并具備準(zhǔn)確,、便攜,、操作容易等特點(diǎn)。 螢火蟲(chóng)會(huì)發(fā)光是由于它能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;螢火蟲(chóng)熒光素酶(簡(jiǎn)稱(chēng)蟲(chóng)光素酶,,luciferase),、蟲(chóng)熒光素(D-luciferin)、以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)--三磷酸腺苷(ATP),。在有氧的條件下,,蟲(chóng)光素酶催化蟲(chóng)熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應(yīng)形成氧化熒光素并發(fā)出熒光, 只要具備適當(dāng)條件,,不僅螢火蟲(chóng),,即使在試管中也能發(fā)出熒光。在一個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)中,,當(dāng)蟲(chóng)光素酶和蟲(chóng)熒光素處于過(guò)量的情況下,,熒光的強(qiáng)弱取決于ATP的數(shù)量。因此,,以檢測(cè)含細(xì)菌的樣品為例,,細(xì)菌細(xì)胞越多,ATP量越高,,發(fā)出的熒光也就越強(qiáng),。由于蟲(chóng)光素酶對(duì)ATP的反應(yīng)非常靈敏,熒光強(qiáng)弱可以通過(guò)熒光儀計(jì)量,。所以,,在排除樣品中非細(xì)菌ATP的干擾情況下,通過(guò)熒光值就能確定樣品中細(xì)菌ATP的含量,,通過(guò)相對(duì)熒光值和細(xì)菌細(xì)胞數(shù)的關(guān)系曲線(xiàn),,就能快速確定樣品中細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)。 應(yīng)用領(lǐng)域及優(yōu)特點(diǎn) “快檢系統(tǒng)”可供食品,、飲料,、乳品加工生產(chǎn)的全程監(jiān)測(cè),以及環(huán)保,、水政,、海關(guān)檢疫等執(zhí)fa部門(mén)快速檢測(cè)各種樣品中的微生物(細(xì)菌總數(shù))。表1,、2分別列出使用“快檢系統(tǒng)” 實(shí)施全程監(jiān)控過(guò)程及“快檢系統(tǒng)”和“常規(guī)平皿計(jì)數(shù)”方法的差別和利弊,。 ATP熒光法細(xì)菌總數(shù)快速檢測(cè)系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo) 序號(hào) | 項(xiàng)目名稱(chēng) | 標(biāo) 準(zhǔn) | 1 | 檢測(cè)特性 | 分度裂解及0.45μm過(guò)濾,去除非細(xì)菌細(xì)胞的干擾 | 2 | 實(shí)際檢測(cè)靈敏度(菌落數(shù)) | 100cfu/ml(1cfu/ml使用濃縮器) | 3 | 量程范圍 | 0--1010cfu/ml | 4 | 實(shí)際檢測(cè)靈敏度(ATP) | 5×10-18mol | 5 | 本底計(jì)數(shù)率(s-1) | ≤50 | 6 | 與平皿計(jì)數(shù)相關(guān)性 | 98% | 7 | 8小時(shí)工作不穩(wěn)定性 | ≤5% | 8 | 重復(fù)性(批間差) | ≤3% | 9 | 環(huán)境溫度 | 5-30℃ | 10 | 檢測(cè)器特性 | 光電倍增管及光子計(jì)數(shù)采樣模塊 | 11 | 供電電源 | ~220V 50Hz可使用充電電池 | 12 | 機(jī)身尺寸 | 160×105×50mm |
使用BL細(xì)菌快檢儀實(shí)施食品,、飲料、乳品加工等全程衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè) 生產(chǎn)程序 | 監(jiān)測(cè)內(nèi)容 | 加工生產(chǎn)前 | 生產(chǎn)設(shè)施清潔,、消毒效果檢測(cè),,原、輔料細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),,以保障原料質(zhì)量或明確原料品質(zhì)級(jí)別,。 | 加工生產(chǎn)過(guò)程中 加工生產(chǎn)后 廢棄物排放、環(huán)境,、人員 | 生產(chǎn)設(shè)備關(guān)鍵控制點(diǎn)(例如供水,、通風(fēng)閥門(mén))衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè),影響乳品發(fā)酵飲料,、酒類(lèi)特殊微生物總數(shù)檢測(cè),。 制成品污染細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)。 衛(wèi)生學(xué)及細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),。 |
兩種微生物(細(xì)菌總數(shù))檢測(cè)方法的差別和利弊比較 | ATP熒光快檢 | 常規(guī)平皿計(jì)數(shù) | 可檢范圍 獲得結(jié)果的時(shí)間 操作繁簡(jiǎn) 結(jié)果的效應(yīng) | 所有細(xì)菌,、真菌、藻類(lèi) 1-5分鐘即得實(shí)時(shí)結(jié)果 簡(jiǎn)單,,步驟少 快速,、預(yù)警、溯源 | 只能檢出可在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物(常用LB瓊脂皿只檢出需氧細(xì)菌) 需要多種特定培養(yǎng)基,,需1-5天 煩瑣、步驟多,、人為影響因素多 滯后,、檢出結(jié)果保留時(shí)間長(zhǎng),有利于進(jìn)一步化驗(yàn) |
故障排除 故障 | 可能原因 | 排除方法 | 在無(wú)過(guò)濾比色杯或樣品情況下,,可拉動(dòng)抽屜推入后,,仍顯示高背景讀數(shù) | 1、抽屜被樣品污染 2,、高濕度影響設(shè)備 3,、光敏部件有誤 | 1、用酒精擦抽屜去除污染 2,、重新使用前在干燥情況下放置24小時(shí) 3,、更換或檢修測(cè)光儀 | 有樣品的可拉動(dòng)抽屜推入后無(wú)讀數(shù) | 1、電池電量不足 2,、直流電源接觸不良 3,、斷電 4、可拉動(dòng)抽屜關(guān)閉不嚴(yán) | 1,、如顯示電池電量不足,,可更換電池或改用直流電源 2,、檢查和改善接觸 3、查對(duì)供電情況 4,、重新關(guān)閉抽屜 | 給出的讀數(shù)顯著低于應(yīng)有讀數(shù) | 1,、可拉動(dòng)抽屜不干凈 2、濕度高 3,、加入LLR試劑組后沒(méi)有立即關(guān)閉抽屜讀數(shù) 4,、樣品經(jīng)冷凍或冷藏后使其中的細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)ATP量顯著降低 | 1、擦凈可拉動(dòng)抽屜 2,、使用前在干燥情況下放置24小時(shí) 3,、更換樣品,重新試驗(yàn)讀數(shù) 4,、待樣品及試劑恢復(fù)到室溫后再測(cè)定 |
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