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島津云學(xué)院丨課后答疑系列 液相色譜篇
“島津云學(xué)院”系列開播以來,,得到了眾多用戶的觀看和支持。在直播互動交流中,,收到了很多提問,,島津十分重視各位用戶提出的問題,今天將開啟島津云學(xué)院答疑系列,,為大家作詳細(xì)解答,!
請問老師一般液相廢液怎么處理?
答:需要明確的是,,液相色譜的廢液中含有大量的有機(jī)溶劑以及所測試的樣品,,大部分情況下是有毒有害的,因此不能直接傾倒至環(huán)境中,,或者流入實驗室下水道中,,需要集中處理。一般而言,,可以根據(jù)不同的情況進(jìn)行處理:
1,、如果廢液量較少:如分析型色譜的廢液,可先行收集,,然后等待集中處理(尤其是含有劇毒成分的),,比如尋找專業(yè)的廢液回收機(jī)構(gòu);如果所在單位/機(jī)構(gòu)不支持集中處理,,則可以找安全的地方焚燒或填埋(含酸的需用廢堿中和,,含鹽的可以直接倒掉)。
2,、廢液量很大:如制備色譜的廢液,,則考慮通過精餾系統(tǒng),將廢液分餾后再次使用,。
3,、也可以通過“循環(huán)閥”,將未污染的流動相再次回收利用,。如島津針對分析型液相和制備型液相都可以提供相應(yīng)的“溶劑循環(huán)閥”,,將分析過程中未受到污染的流動相,如色譜峰之間平直的基線(僅限于等度條件下)回收至溶劑瓶中,,將能夠大大提升溶劑使用效率,,降低實驗室成本。
新買色譜柱如何進(jìn)行測試,?
答:對于液相色譜柱來講,,拿到一根新的色譜柱,,先測柱效、拖尾因子,、柱壓(減去系統(tǒng)壓力),,并記錄結(jié)果。
之后使用過程中應(yīng)定期測試,,追蹤色譜柱性能,。因不同類型色譜柱差別較大,因此對于所使用的方法,,請根據(jù)說明書上的液相條件和測試樣品進(jìn)行,,同時需要確保儀器的狀態(tài)正常。
色譜柱用什么沖洗,?
答:反相與正相體系清洗方式有所不同:
反相色譜柱
1,、日常清洗:10%甲醇水(去除極性大的雜質(zhì))→純甲醇(去除非極性雜質(zhì))。
2,、流動相中含有離子對試劑:50%有機(jī)溶劑(10倍柱體積)→10%有機(jī)溶劑(20倍柱體積)→100%有機(jī)溶劑(20倍柱體積)→保存,。
3、生物樣品(蛋白質(zhì)/多肽)污染的色譜柱:B 5% →B 100%的梯度洗脫×3次(A:0.1%TFA B:0.1%TFA in CH3CN)→100%有機(jī)溶劑(20倍柱體積)→保存,。
正相色譜柱
親水性雜質(zhì)吸附太強(qiáng),,常規(guī)清洗效果不明顯,可以逐級增加洗脫強(qiáng)度,,每級至少確保10倍柱體積,。
I級:100%正己烷
II級:100%乙酸乙酯
III級:50%三氯甲烷-50%甲醇
注意:回歸到初流動相條件時,請務(wù)必先用異丙醇過渡,。
用反相色譜的液相系統(tǒng)可以跑正相嗎,?剛剛老師提到用異丙醇沖洗管路,那我跑完反相的用異丙醇沖洗是不是就可以跑正相了,?
答:一般來講,,當(dāng)把一臺液相色譜儀即當(dāng)作正相色譜用,也當(dāng)做反相色譜用的時候,,在兩個不同分析模式之間切換時需要用異丙醇做充分的過渡(比如通宵低流速異丙醇沖洗管路),,其主要是利用異丙醇可以分別與正/反相溶劑互溶的特性,避免流動相殘留造成的影響,。
但有一點需要注意的是,,所使用的液相色譜儀是否適用于正相溶劑。通常液相色譜儀的主要設(shè)計目的是適用于反相體系使用,,因此在使用正相體系前,,好與供應(yīng)商確認(rèn),尤其是使用特殊溶劑前(如HFIP,,DMF等),。
如您還有其他關(guān)于液相色譜的疑問,,請掃描以下二維碼提交問題,小編會把問題交給講師解答,,答案將在后續(xù)答疑系列中推送,,敬請留意。
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