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多肽類藥物是一種中分子藥物,，具有低成本制造的優(yōu)點，且由于其分子量小,，易于進入細胞,，可以在進入人體后通過采用特定的三維結構來有效防止降解，因此備受關注,。由于此類多肽類藥物與小分子藥物相同,，是通過化學合成產生的，因此純化,、分級和確認最終合成產物的純度至關重要,。質譜聯(lián)用儀因為能夠基于MS觸發(fā)功能對目標化合物進行高度選擇性的分餾，從而在合成肽的制備純化中實現(xiàn)了高效的制備純化工作,，也逐漸應用于多肽類藥物分析,。

島津推出全新小型化液質聯(lián)用儀LCMS-2050實現(xiàn)了質譜聯(lián)用儀的小型化設計，使得它可以靈活地與LC系統(tǒng)進行無縫融合,；憑借島津在多年質譜開發(fā)中積累的技術,，實現(xiàn)了超凡的小型化和高性能融合，展現(xiàn)出優(yōu)異的穩(wěn)定性,；操作簡便,，即使對于沒有質譜儀使用經驗的用戶，也可以輕松上手,。

全新小型化LCMS-2050在分析/制備雙流路系統(tǒng)合成肽高效制備純化中的應用

在分析流路中研究了含有目標合成肽（甲狀旁腺激素 （1-34）：PTH）的粗合成樣品的分離條件,。圖2顯示了優(yōu)化分離條件前樣品的 UV 色譜圖（分析條件：表1）。在這些條件下,，PTH與共存雜質之間的分離不充分,，即使增加上樣量也只會進一步惡化與雜質的分離，因此改善分離條件對于回收高純度PTH至關重要,。

分析流路中分離條件的優(yōu)化

使用UV和MS觸發(fā)器對PTH進行分餾,，制備條件如表2所示（僅列出了與表1不同的參數(shù)），所得LC色譜圖如圖4所示（藍色區(qū)域為分餾區(qū)間）,。在放大前后獲得了類似的分餾模式,，并保持了與雜質的分離,；MS和UV觸發(fā)器的組合使用導致高度選擇性的PTH分餾。

純度確認和回收率評估

圖5顯示了將分餾后的PTH重新注入分析流路所獲得的色譜圖與分餾前合成樣品的色譜圖,，該樣品的理論濃度與分餾后的PTH的理論濃度相同,，由此表示目標PTH已純化成功。

使用血管緊張素I的標準溶液評估該系統(tǒng)裝置的制備性能（純度和回收率）,。圖6顯示了將分餾的血管緊張素I重新注入分析流路時獲得的色譜圖及制備的標準溶液的色譜圖,。純度和回收率如表3所示。根據(jù)面積歸一法計算結果,，純度為100%,；根據(jù)峰面積比較計算的回收率為97.9%，這表示該系統(tǒng)能夠完成可靠的制備流程,。

結論

通過本應用可以了解到使用同時配備分析和制備雙流路的制備純化液相色譜質譜聯(lián)用儀Nexera Prep系統(tǒng)可應用于合成肽的制備純化,，其中全新小型化LCMS-2050能夠基于MS觸發(fā)功能對目標化合物進行高度選擇性的分餾，從而使該系統(tǒng)更加高效地完成合成肽的制備純化工作流程,。

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