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在mRNA疫苗的研究中,，液相分析是一種常用的檢測手段,。然而，由于mRNA含有磷酸基團,，使用常規(guī)液相分析時很容易與金屬管路發(fā)生吸附,，導致結果重復性差、殘留量高,、無法準確分析等問題,。目前常用的解決方法是使用高濃度mRNA疫苗樣品連續(xù)多次進樣，對管路進行飽和處理,，等待峰面積穩(wěn)定后再進行數據采集,。然而，這種方法仍然存在一些問題,，如進樣殘留,、耗時、樣品浪費等,。

為了解決金屬吸附現象并獲得穩(wěn)定的結果,，成為mRNA疫苗液相分析中的關鍵挑戰(zhàn)。島津推出了生物惰性超高效液相色譜Nexera XS inert系統,，采用無金屬樣品流路,，在耐高壓的同時，具有出色的抗吸附能力,，能夠有效解決mRNA疫苗液相分析中吸附殘留等難題,。本文將介紹使用該系統開發(fā)mRNA疫苗檢測分析的方法，無需飽和吸附,、額外清洗,，即可獲得穩(wěn)定、高效,、低殘留的檢測結果,。

使用設備：Nexera XS inert生物惰性超高效液相色譜

流動相A：0.1mmol/L三乙基乙酸銨：異丙醇（900:22.5, v:v）

流動相B：0.1mmol/L三乙基乙酸銨：乙腈：異丙醇（600:200:20, v:v:v）

洗脫方式：梯度洗脫

其他參數：略

使用以上條件，分析得到mRNA疫苗供試品的典型色譜圖如下

mRNA疫苗供試品色譜圖

為了驗證Nexera XS inert系統針對mRNA疫苗中金屬吸附分子的抑制效果,，平行進樣6次,，進行重復性的考察。結果見下表,，保留時間RSD值0.08%,，峰面積RSD值1.09%，表明Nexera XS inert系統分析mRNA疫苗重復性良好,。

mRNA疫苗供試品重復性驗證結果（n=6）

為了驗證進樣殘留,，使用常規(guī)液相與Nexera XS inert系統進樣對比,，采用mRNA疫苗供試品進樣7針后，再連續(xù)分析3針空白溶劑的方法去評估殘留,。對比結果見下圖,，Nexera XS inert系統在多次進樣后，殘留低于常規(guī)液相,，第1-3針空白的殘留分別為0.69%,、0.43%、0.28%,，殘留水平滿足mRNA疫苗分析要求,。

常規(guī)液相和生物惰性液相mRNA疫苗供試品分析對比圖

總結

本文采用島津Nexera XS inert生物惰性超高效液相建立了一種用于分析mRNA疫苗樣品的方法。經過重復性和殘留量的考察,，該系統在無需進行預飽和處理的情況下,，直接進行樣品分析后，mRNA目標成分的保留時間和峰面積的相對標準偏差分別為0.08%和1.09%,；無需進行額外的殘留處理,，三個空白溶劑的殘留量分別為0.69%、0.43%和0.28%,；以上結果表明,，該方法滿足mRNA疫苗重復性和殘留量的檢測要求，為mRNA疫苗檢測分析提供穩(wěn)定,、高效,、低殘留的檢測結果。

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