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司小令第四季第四期——又想UHPLC又想SFC分析怎么辦,?
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大家好,,這里是司小令大講堂第四季,!第三期我們?yōu)榇蠹曳窒砹酥苽湫统R界流體色譜(SFC)的特點(diǎn)和應(yīng)用,以及從分析規(guī)模到制備規(guī)模如何過渡,。第四期我們將探討一個新話題:在日常分析過程中,,有時我們可能會面臨一臺儀器無法同時滿足不同分析方法的情況,比如一臺色譜儀既想用于UHPLC又想用于SFC分析,,該怎么辦呢,?本期內(nèi)容就為大家?guī)斫獯稹?/span>
對于許多科研人員和實(shí)驗(yàn)室工作者來說,開發(fā)分析條件時,,如果能夠分別使用超高效液相色譜儀(UHPLC)和超臨界流體色譜儀(SFC),,則可以從更廣泛的分離條件中找出理想的分離條件。
然而,,對于實(shí)驗(yàn)室管理人員來說,,安裝兩臺設(shè)備將對實(shí)驗(yàn)室的空間大小要求更高,使用和維護(hù)成本也比一臺設(shè)備更多,;對于分析工作者來說,,在同時使用UHPLC和SFC的過程中,,由于分析體系不同,需要耗費(fèi)大量的時間去預(yù)平衡兩種設(shè)備,,不同分離條件的設(shè)置也是一件巨大的工程,。這樣看來,理想和現(xiàn)實(shí)的差距還是蠻大的,。那究竟有沒有兩全其美的“二合一”解決方案呢,?還真有。
設(shè)計原理上,,由于SFC主要是基于LC的基礎(chǔ)上再開發(fā)的,,相比LC主要增加了CO2的輸送泵和控制系統(tǒng)壓力的背壓控制單元,其余的溶劑輸送泵,、自動進(jìn)樣器,、柱溫箱和檢測器是通用的。理論上,,通過在標(biāo)準(zhǔn)UHPLC系統(tǒng)中增加CO2輸送泵和背壓控制單元,,即可滿足UHPLC和SFC兩種分析模式的硬件要求。
島津開發(fā)了一套集UHPLC和SFC功能于一體的 Nexera UC/s系統(tǒng),,系統(tǒng)流路圖如下:
Nexera UC/s系統(tǒng)流路圖(綠色線路為使用SFC時)
硬件上:Nexera UC/s可以看作在SFC系統(tǒng)中增加了1臺UHPLC輸送泵,,通過切換輸液泵和背壓控制單元的壓力開/關(guān),實(shí)現(xiàn)UHPLC和SFC兩種模式分析,,這樣不僅減少了安裝空間和采購成本,,同時提高了儀器整體利用率。當(dāng)然,,基于SFC和UHPLC分析的溶劑輸送泵,、自動進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測器均可以共享的前提下,,Nexera UC/s同樣支持在現(xiàn)有UHPLC系統(tǒng)升級為該系統(tǒng),。除此之外,考慮到方法開發(fā)時,,不同填料色譜柱之間的手動切換效率低的情況,Nexera UC/s采用搭配流路切換閥和色譜柱切換閥,,可實(shí)現(xiàn)最多12根色譜柱的自動切換,,提高分析方法的開發(fā)效率。
Method Scouting Solution設(shè)定窗口
批處理序列(紅框是模式切換平衡方法)
軟件上:島津開發(fā)了一款支持在UHPLC和SFC模式之間切換的專用軟件Method Scouting Solution,,可用于自動創(chuàng)建和執(zhí)行切換模式所需操作的批處理表,,例如清除前一模式所用的流動相,并用下一模式所需的流動相清洗流路,。
分析人員使用Method Scouting Solution軟件時,,僅需5步,,輸入:(1)流動相、(2)色譜柱,、(3)樣品,、(4)用于分析的基本方法和(5)梯度條件(初始濃度、最終濃度和梯度),,軟件可以自動生成用于方法探索的批處理序列(包含了不同模式之間切換的預(yù)平衡方法),。即使是第一次使用UHPLC和SFC之間的自動切換也能輕松上手。此外,,當(dāng)多個分析人員使用時,,可以在同一數(shù)據(jù)庫中管理所使用的色譜柱和流動相信息,以提高管理效率并最大限度地減少操作錯誤,。
應(yīng)用:UHPLC/SFC模式的連續(xù)切換對于系統(tǒng)的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性提出了大的挑戰(zhàn),,讓我們來看看島津Nexera UC/s的重現(xiàn)性如何。
基于Nexera UC/s切換系統(tǒng),,通過UHPLC和SFC分析之間的連續(xù)切換來分析三種藥物成分,,每種模式進(jìn)樣5針,連續(xù)切換2次,,結(jié)果見下圖,,通過色譜圖疊加可以看出,UHPLC和SFC模式連續(xù)切換時,,分析結(jié)果穩(wěn)定可靠,,重現(xiàn)性良好。
通過UHPLC和SFC分析模式之間的切換獲得的三種藥物成分的色譜圖
總結(jié):UHPLC/SFC切換系統(tǒng)既滿足了方法開發(fā)時對不同分離模式的需要,,提高分析方法開發(fā)效率,;同時“二合一”的設(shè)計也能有效減少安裝空間和采購成本,提高儀器整體利用率,。面對又想UHPLC又想SFC分析的困境,,實(shí)現(xiàn)了“兩全其美”的效果。
好啦,!今天聊了這么多,,小伙伴們在超臨界流體色譜使用場景的了解是不是更豐富了呢?喜歡還請持續(xù)關(guān)注司小令哦,!
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