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島津成像質(zhì)譜顯微鏡應(yīng)用專題丨小鼠大腦成像分析
優(yōu)勢(shì)
● iMScope QT可測(cè)量的最大范圍超過100萬像素,能夠進(jìn)行大面積樣本分析,例如在一次檢測(cè)中對(duì)小鼠大腦全切片進(jìn)行分析。
● iMScope QT的分析速度比前一代產(chǎn)品快8倍以上,能夠進(jìn)行快速分析,。
● iMScope QT具有高質(zhì)量準(zhǔn)確度、分辨率及高空間分辨率,,能夠進(jìn)行精確質(zhì)譜成像分析,。
概述
質(zhì)譜成像技術(shù)可以通過質(zhì)譜儀直接檢測(cè)生物分子和代謝物,同時(shí)保留其在樣本組織上的位置信息,,因此,,可以生成不同生物分子基于特定離子信號(hào)強(qiáng)度和位置信息的二維質(zhì)譜圖像。iMScope成像質(zhì)譜顯微鏡是用于質(zhì)譜成像分析的整合型儀器,,結(jié)合了光學(xué)顯微鏡和質(zhì)譜儀,,能夠分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和分布特征,拓展了藥物研發(fā)和代謝物研究等領(lǐng)域的范圍,。通過將MALDI轉(zhuǎn)換成LC和ESI系統(tǒng),,iMScope還可用于LC-MS定性及定量分析。本文將介紹配備Q-TOF質(zhì)譜儀的新型iMScope QT(圖1),并與前一代iMScope TRIO設(shè)備進(jìn)行比較,。
圖1 iMScope QT
小鼠全腦切片分析
前一代iMScope TRIO設(shè)備的最大可測(cè)量范圍是250 × 250像素,。在iMScope QT中,,可測(cè)量范圍已擴(kuò)展至1024 × 1024像素,,能夠以15 μm的空間分辨率分析小鼠全腦切片(約17mm × 9.4 mm)。根據(jù)表1條件進(jìn)行檢測(cè),,可在m/z 885.557處獲得磷脂酰肌醇PI (38:4),并在m/z 888.631處獲得硫苷脂(C24:1)的清晰質(zhì)譜圖像(圖2),。
此外,,由于iMScope QT的最大激光頻率為20 kHz,分析速度比iMScope TRIO快8倍以上,。結(jié)果顯示完成圖2所示的小鼠全腦切片(702624 pix)質(zhì)譜成像分析僅需6小時(shí),。
表1 分析條件
圖2 小鼠全腦切片的質(zhì)譜成像結(jié)果(空間分辨率:15 μm)
小鼠小腦的高空間分辨率分析
對(duì)小鼠小腦附近的區(qū)域進(jìn)行高空間分辨率質(zhì)譜成像分析,如圖2(a)中紅色部分所示,。根據(jù)表1中的分析條件,,空間分辨率為5 μm。如圖所示,,可在m/z 885.557處獲得 PI (38:4),、在m/z 888.631處獲得硫苷脂(C24:1),,檢測(cè)到更清晰更詳細(xì)的質(zhì)譜圖像(圖3(b)和(d)),。
此外,,由于iMScope QT的質(zhì)量準(zhǔn)確度和分辨率較高,,能夠分離和檢測(cè)PI (38:4)的同位素(m/z 888.573)和硫苷脂(C24 :1)(m/z 888.631),并能提取每種同位素的質(zhì)譜圖像(圖3(c)和3(d)),。而iMScope TRIO則無法獲得以上結(jié)果,。
圖3 小鼠小腦的光學(xué)圖像和質(zhì)譜圖像(空間分辨率:5 μm)
(a) 光學(xué)圖像
(b) PI (38:4)的質(zhì)譜圖像,,m/z 885.557
(c) PI (38:4)同位素的質(zhì)譜圖像,,m/z 888.573
(d) 硫苷脂(C24:1)的質(zhì)譜圖像,,m/z 888.631
結(jié)論
與iMScope TRIO相比,,iMScope QT的分析范圍更廣,,分析速度更快,,可實(shí)現(xiàn)更廣泛的快速成像分析,。此外,,隨著檢測(cè)準(zhǔn)確度和分辨率的提高,能夠?qū)Ω鞣N目標(biāo)化合物進(jìn)行高精確度,、高特異性的質(zhì)譜成像分析,。
iMScope QT不僅整合了質(zhì)譜和形態(tài)學(xué)分析,,而且能夠在更廣泛的領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)更快速,、更靈敏以及更高的空間分辨率的檢測(cè),。
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