淺談中藥行業(yè)LC及應用常見問題
各位老師好,,今天主要聊一聊中藥行業(yè)關于液相的一些常見問題和一些品種的注意事項,。
做中藥分析,,因為中藥品種太多,,樣品也比較臟,,液相遇到最多的問題就是壓力過高,,首先要確認是哪個部件造成的,可以用兩通替換掉色譜柱,,用純水1ml流速看一下系統(tǒng)壓力,,一般LC-20AT/AD的壓力在1MPa以下就是正常的。既然液相系統(tǒng)沒有堵塞,,那么就是緩沖鹽或者某些雜質把色譜柱堵了,,這時就需要用10%甲醇水長時間沖洗,可以嘗試用0.2ml/min流速沖一晚,,記得不要接檢測器,,防止雜質堵塞流通池,可以在色譜柱出口接一個燒杯,,一般情況下不建議反沖,。
一些品種實驗時的注意事項
這里選取一些有代表性的品種,分別是:制川烏,、枳實,,薏苡仁。
首先說一說制川烏,,它代表了流動相中含四氫呋喃的品種,,四氫呋喃的極性較弱,洗脫能力較強,,而且四氫呋喃溶解性較強,,會對色譜柱填料造成不可逆的損傷。
實驗時要注意色譜柱平衡時間需要更長(1小時以上),,梯度時間程序回到初始比例后的時間也要設定長一些,,做完實驗后沖洗時間要更長,不然容易發(fā)生堵塞情況,。建議“專柱專用",,用過四氫呋喃的色譜柱不要再做其它實驗,。
然后聊一聊枳實,它代表了流動相中含離子對試劑(十二烷基磺酸鈉,,辛烷磺酸鈉等)的品種,。離子對試劑是由強親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對,。因此,,可用于同時分離帶電分子和非帶電分子。
實驗時要注意離子對試劑盡量和有機相混在一起配制,,平衡時間需要更長,。枳實的對照品和樣品溶液的溶劑都是水,所以要做到臨用新制,。不然可能會發(fā)生溶劑效應或者保留時間不一致的現(xiàn)象。
最后講一講薏苡仁,,薏苡仁用到的是蒸發(fā)光檢測器,,使用的是乙腈和二氯甲烷流動相。二氯甲烷與水不能互溶,,所有二氯甲烷所接觸的容器都要保證干燥,。
實驗時要注意實驗全程不能接觸水,包括流動相瓶,、液相管路(除了洗針液),,色譜柱。此品種建議配制混合流動相,,分析時先用純乙腈沖洗系統(tǒng)1小時,,然后換成流動相平衡最低30分鐘直至基線穩(wěn)定再進樣,使用250mm色譜柱時建議在藥典允許范圍內調整流動相比例至乙腈-二氯甲烷(65:35),,如果有水,,可能會發(fā)生不出峰的情況。建議分配一根色譜柱給此品種專用,,實驗結束后用純乙腈沖洗系統(tǒng)1小時后再取下,。