其實(shí)無(wú)需做大量調(diào)研,，只要關(guān)注“島津應(yīng)用云”公眾號(hào)就可以了解到很多相關(guān)信息。

現(xiàn)在就讓小編帶您深入了解島津在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng),。該套系統(tǒng)通過(guò)對(duì)傳統(tǒng)液相的自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行改造,，可以同時(shí)和多個(gè)灌流培養(yǎng)生物反應(yīng)器（發(fā)酵罐）相連（圖1），實(shí)時(shí)監(jiān)控多個(gè)生物反應(yīng)器在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中各個(gè)化合物的變化趨勢(shì),，方便在第一時(shí)間發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,，緊急采取應(yīng)對(duì)措施，及時(shí)止損,，該套在線液相監(jiān)控系統(tǒng)已在2021年8月獲得專利授權(quán)（中國(guó)實(shí)用新型,，專利號(hào)：ZL202023017774.5）。

圖1. 在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)（專利保護(hù),，版權(quán)所有,，違者必究）

其中后端檢測(cè)器，可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行搭配。如果只需要監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的氨基酸組分,，可以選擇紫外檢測(cè),；如果想同時(shí)監(jiān)控多類化合物的變化趨勢(shì)，例如同時(shí)分析氨基酸類,、糖類,、維生素類、核苷類等,，可以選擇三重四極桿質(zhì)譜配套島津細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包,。

案例分享1：在線監(jiān)控氨基酸類化合物（在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)+紫外檢測(cè)器）

自動(dòng)在線取樣器定時(shí)吸取細(xì)胞上清液后，根據(jù)軟件設(shè)定的程序,，對(duì)樣品進(jìn)行自動(dòng)柱前衍生,，無(wú)需人為干涉，衍生完成后觸發(fā)自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣分析,，下圖為檢測(cè)到的氨基酸色譜圖,。

圖2. 氨基酸自動(dòng)柱前衍生色譜圖

注：不同的培養(yǎng)方案監(jiān)控的氨基酸不一樣，此圖僅為舉例,。

案例分享2：同時(shí)在線監(jiān)控100多種化合物（在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)+三重四極桿質(zhì)譜+細(xì)胞上清液方法包）

當(dāng)需要同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞上清液多類化合物時(shí),，可以在在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)后端配置三重四極桿質(zhì)譜儀，結(jié)合已獲得專利授權(quán)的細(xì)胞上清液分析技術(shù)（中國(guó)發(fā)明專利,，專利號(hào)：ZL201610888146.3）,，17分鐘可以同時(shí)快速分析細(xì)胞上清液中125種化合物，包括4種糖,、60種氨基酸及其代謝物,、31種核苷及其代謝物、15種維生素類以及15種其他類化合物（圖3）,。

圖3. 同時(shí)分析細(xì)胞上清液中100多種化合物L(fēng)C-MS/MS色譜圖

案例分享3：多個(gè)生物反應(yīng)器在線監(jiān)控

在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)可以連接多個(gè)生物反應(yīng)器,，依次進(jìn)行分析（表1）。通過(guò)軟件設(shè)置不同生物反應(yīng)器的采樣時(shí)間,，例如,，第一天早上，9點(diǎn),，1#生物反應(yīng)器采樣并進(jìn)行分析,；10點(diǎn)，2#生物反應(yīng)器采樣并進(jìn)行分析……以此類推,；第二天同一時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行同一生物反應(yīng)器的第二次取樣,，以此類推，直至細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束,。

表1. 一套在線液相實(shí)時(shí)監(jiān)控系統(tǒng)監(jiān)控6個(gè)生物反應(yīng)器時(shí)間表

軟件采集的數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Multi-omics Analysis Package軟件進(jìn)一步處理后生成歸類趨勢(shì)圖,。

圖4. 某細(xì)胞上清液中檢測(cè)到的化合物相對(duì)含量變化趨勢(shì)圖