離子對試劑：

極性藥物分析繞不開的話題

液相色譜是藥物雜質(zhì)含量測定和有關(guān)物質(zhì)分離分析常用的技術(shù)手段,。對一個陌生的化合物，ODS反相色譜柱通常方法開發(fā)條件會選擇酸性pH流動相,。然而,，總有些化合物，它們或含氨基,、或含羧基,、磺酸基團、磷酸基團,，極性較強在反相色譜柱上沒有保留,。打開2020版《中國藥典》第二部，不難發(fā)現(xiàn)這些品種,，名稱中常含有“馬拉酸”,、“鹽酸”、“堿”,、“酸”等關(guān)鍵詞,。對于這類強極性化合物的分析，藥典給出的答案是：流動相中添加離子對試劑,。例如丁溴東莨菪堿,、貝敏偽麻的有關(guān)物質(zhì)流動相條件中含有十二烷基硫酸鈉；馬來酸曲美布汀的流動相含有戊烷磺酸鈉,；鹽酸頭孢吡肟的流動相含有辛烷磺酸鈉,；葉酸、頭孢美唑和對氨基水楊酸鈉的流動相含有四丁基氫氧化銨,。離子對試劑的添加,，增強了極性化合物的保留，改善了藥物與雜質(zhì)的分離,，是極性藥物分析的*,。

離子對試劑：

“質(zhì)譜不能承受之重”

辛烷磺酸鈉和四丁基硫酸氫銨等常用離子對試劑，屬于不揮發(fā)鹽類,，質(zhì)譜響應(yīng)強且信號經(jīng)久不衰,，持續(xù)抑制目標(biāo)化合物的電離。一旦誤操作進入質(zhì)譜端,，需要清洗整個離子通路才能恢復(fù)質(zhì)譜的正常狀態(tài),。常規(guī)二維液相在線除鹽系統(tǒng)僅能去除無機鹽，無法去除離子對試劑,。這是因為無機鹽（如磷酸鹽）在二維反相色譜柱上無保留,，在死時間將其切至廢液從而實現(xiàn)在線除鹽。然而離子對試劑具有較強的疏水性,，在常規(guī)ODS色譜柱上強烈吸附顯著拖尾,，因此不能被常規(guī)二維液相系統(tǒng)去除。

上圖是辛烷磺酸鈉在ESI離子源上的響應(yīng),?？缮纱仉x子，質(zhì)譜響應(yīng)強且持久,，對ESI正負(fù)模式均可產(chǎn)生抑制,。

上圖是四丁基硫酸氫銨在ESI離子源正模式的響應(yīng)，質(zhì)譜響應(yīng)強且持久,。四丁基硫酸氫銨與固定相強烈作用,，色譜上呈現(xiàn)顯著拖尾。

ReDual:一款可以同時分離無機,、

有機,、陰、陽離子的“神柱”

ReDual系列色譜柱,，是島津公司最新推出的離子交換反相混合鍵合相色譜柱,，共分為三款：

ReDual™ SCX-C18 強陽離子交換+反相

ReDual™ CX-C18  弱陽離子交換+反相

ReDual™ AX-C18  強陰離子交換+反相

下圖是采用ReDual AX-C18 (4.6 mm I. D. × 150 mm L., 5 µm，貨號426-45415)分析磷酸二氫鈉,、四丁基硫酸氫銨和卡絡(luò)磺鈉混合樣品的色譜圖,。該款色譜柱表面鍵合叔胺基團,，在pH 2-7范圍內(nèi)色譜柱表面帶陽離子。除疏水作用外,，其對陰離子具有離子交換作用,，對陽離子具有離子排斥作用。為分離極性類似的陽離子和陰離子型化合物提供了條件,。下圖中四丁基氨根離子峰型對稱,，不拖尾無殘留，可以通過閥切換導(dǎo)入廢液實現(xiàn)在線去除,。

ReDual AX-C18色譜柱NQAD檢測器同時分離無機有機陰陽離子（1：Na+;2：四丁基氨根離子,；3：H2PO3-;4：卡絡(luò)磺酸根離子）

應(yīng)用案例：

卡絡(luò)磺鈉參比制劑中雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定

本應(yīng)用采用常規(guī)中心切割二維液相系統(tǒng)，無需改造儀器,；餾分轉(zhuǎn)移過程配有紫外檢測器監(jiān)控,，不存在檢測盲區(qū)；離子對試劑的去除未使用強酸或強堿性試劑,；方法耐用性好,。一維使用C18反相色譜柱，流動相添加磷酸二氫鈉（含四丁基硫酸氫銨,，pH 3.0）,；二維使用ReDual AX-C18色譜柱，在線去除四丁基硫酸氫銨和磷酸二氫鈉,，實現(xiàn)目標(biāo)化合物的質(zhì)譜鑒定,。

卡絡(luò)磺鈉雜質(zhì)2的質(zhì)譜鑒定結(jié)果

總結(jié)

島津中國創(chuàng)新中心搭載的特色中心切割二維色譜雜質(zhì)鑒定系統(tǒng)，二維使用島津公司最新推出的ReDual™ AX-C18強陰離子交換反相混合鍵合相色譜柱,，成功實現(xiàn)一維流動相中離子對試劑和無機鹽的在線去除,，并對卡絡(luò)磺鈉參比制劑中未知雜質(zhì)進行了質(zhì)譜鑒定。