細(xì)胞培養(yǎng)基是生物制藥的重要原料，影響生物藥的產(chǎn)量和質(zhì)量,，更是規(guī)?；a(chǎn)成本控制的重要環(huán)節(jié)。

長期以來,，國內(nèi)無血清培養(yǎng)基主要依賴進(jìn)口,，易受形勢和貿(mào)易政策的影響，尤其是2020年以來疫情爆發(fā),，國內(nèi)各單位和企業(yè)都在加速推進(jìn)疫苗和生物藥生產(chǎn)的進(jìn)度,，因此對培養(yǎng)基的需求也日益增大，為了保證培養(yǎng)基安全和持續(xù)供應(yīng),，國產(chǎn)培養(yǎng)基迅速發(fā)展,。

但要與占主導(dǎo)地位的進(jìn)口培養(yǎng)基競爭，需要*的產(chǎn)品性能和良好的批次間質(zhì)量穩(wěn)定性作為保證,。因此,，對細(xì)胞培養(yǎng)基中糖類,、氨基酸、維生素,、核苷酸,、脂類、代謝物等有機(jī)組分,，以及鈉,、鎂、鉀,、鈣等無機(jī)元素組分進(jìn)行監(jiān)測和質(zhì)控至關(guān)重要,。

但是目前常用的細(xì)胞培養(yǎng)基和培養(yǎng)上清液的檢測技術(shù)存在以下問題：

? 檢測指標(biāo)少，僅分析葡萄糖,、谷氨酰胺和乳酸等少數(shù)化合物,；

? 無同時分析方案，一種培養(yǎng)基需要多種儀器多種方法完成檢測,；

? 耗時費力,，一種培養(yǎng)基大致需3天的時間才能完成檢測。

為解決上述問題,，島津開發(fā)了細(xì)胞培養(yǎng)上清液多組分同時分析技術(shù),，可快速檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中有機(jī)組分和無機(jī)元素的含量。

島津自*在業(yè)內(nèi)推出細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析技術(shù)以來,，緊貼用戶需求,，深入研究，目前已形成以下解決方案：

★ 有機(jī)組分分析解決方案,，包括細(xì)胞培養(yǎng)上清液LC-MS/MS分析方法包,，可以分析糖類、氨基酸,、維生素,、核苷酸和細(xì)胞代謝物等125種有機(jī)組分；以及脂質(zhì)介質(zhì)LC-MS/MS分析方法包,，可以分析196種脂類及其代謝物,；

★ 無機(jī)元素分析解決方案，可以同時分析多種無機(jī)元素,。

以上解決方案,，助您揭開細(xì)胞培養(yǎng)上清液組分及其在培養(yǎng)過程中變化趨勢的神秘面紗。

該技術(shù)真的如此神奇嗎,？接下來為您細(xì)細(xì)道來,。

1有機(jī)組分分析解決方案

大家已知曉細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包的大致輪廓，接下來讓我們認(rèn)識它豐富的內(nèi)涵：

★ 島津?qū)＠?/font>技術(shù)（申請?zhí)枺?/font>201610888146.3，申請日：2016.10.11）,；

★17分鐘內(nèi),，同時分析125種培養(yǎng)基組分及代謝物；

★專屬數(shù)據(jù)處理軟件,，快速繪制化合物含量變化  趨勢圖,；

★ 內(nèi)置液相分離條件、質(zhì)譜參數(shù)和前處理方法,，即裝即用,，無需優(yōu)化；

★ 化合物種類全,，包括糖類,、核苷酸、氨基酸,、有機(jī)酸,、抗生素等，支持自行擴(kuò)展,。

該方法包不僅囊括了您所關(guān)注的各類組分,，而且分析時間短、分析參數(shù)無需優(yōu)化……

就連前處理也是簡單到?jīng)]朋友呢,！只需要簡單蛋白沉淀和離心，即可上機(jī)分析,。

下面給大家分享兩個細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包的應(yīng)用案例：

抗體藥物生產(chǎn)用三種不同培養(yǎng)基組分含量差異對比

部分分析結(jié)果展示如下：

上圖中縱坐標(biāo)為目標(biāo)物和內(nèi)標(biāo)物的峰面積比,，橫坐標(biāo)代表三種不同的培養(yǎng)基。結(jié)果顯示1#和2#培養(yǎng)基各組分的含量相近,，而3#培養(yǎng)基各組分的含量與1#和2#培養(yǎng)基相差較大,。

由此可見，該技術(shù)既可用于培養(yǎng)基組分檢測,，也可用于不同品牌和不同批次培養(yǎng)基組分含量差異檢測,，更好地進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制。

融合蛋白藥物補(bǔ)料工藝優(yōu)化

該藥物生產(chǎn)過程中需要在第3,、5和8天添加補(bǔ)料,。每天取樣后添加補(bǔ)料，含量變化在補(bǔ)料后一天體現(xiàn),。連續(xù)14天取樣,，采用本方法進(jìn)行分析，并繪制含量變化趨勢圖,。部分結(jié)果如下所示,。

三個代表化合物的含量均在第4、6和9天有明顯提升，與補(bǔ)料工藝相符,。通過添加補(bǔ)料,，葡萄糖含量在整個培養(yǎng)過程中較為穩(wěn)定。胱氨酸含量需酌情增加,。天冬氨酸含量可酌情減少,。可見,，該技術(shù)可以指導(dǎo)補(bǔ)料工藝優(yōu)化,，也可以用于培養(yǎng)基配方優(yōu)化，助力藥物表達(dá)量的提高,，同時更好地進(jìn)行培養(yǎng)基成本控制,。

除上述“細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析方法包”包含的糖類、氨基酸,、核苷酸和維生素等物質(zhì)外,，脂類物質(zhì)也是細(xì)胞培養(yǎng)基常見添加物質(zhì)。

對細(xì)胞培養(yǎng)來說,，脂類化合物是一類水不溶性的,、與生物合成相關(guān)的脂肪酸及其衍生物的總稱。這類化合物可作為能量儲存,，也可作為細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)組分,，還可以在運輸和信號系統(tǒng)中起作用。

因此,，越來越多的客戶開始關(guān)注細(xì)胞培養(yǎng)上清液中脂類化合物的分析,。《島津脂質(zhì)介質(zhì)LC-MS/MS分析方法包》,，包含花生四烯酸,、DHA、EPA,、乙酰醇胺和其他脂肪酸及它們的代謝物,，共196種脂質(zhì)介質(zhì)化合物，可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液中脂類物質(zhì)的分析,，揭示其在培養(yǎng)過程中的含量變化趨勢,，從而助力培養(yǎng)工藝優(yōu)化。

2無機(jī)組分分析解決方案

細(xì)胞培養(yǎng)液中除了含有糖類,、氨基酸,、維生素等有機(jī)營養(yǎng)成分，還含有微量和痕量的無機(jī)元素,，它們對細(xì)胞培養(yǎng)又有什么作用呢,？

?鈉,、鉀、鎂,、鈣,、鐵等微量元素，可以維持細(xì)胞滲透壓平衡,；

?鈷,、銅、鉛,、鎘等痕量元素,，影響代謝途徑、某些酶和信號分子的活性,；

? 額外補(bǔ)充的Zn2+,、Cu2+、Mn2+等,，還可以提高產(chǎn)率和改善蛋白質(zhì)量,。

可以說這些微量和痕量元素，對細(xì)胞培養(yǎng)可是少而精,，萬萬*的呢,！

島津公司作為細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析領(lǐng)域的者，*推出了元素分析解決方案,，開發(fā)了ICPMS-2030 測定細(xì)胞培養(yǎng)液中多種元素含量的分析方法,。

應(yīng)用該技術(shù)測定了市售某細(xì)胞培養(yǎng)液中鈉、鎂,、鉀,、鈣等多種元素含量。樣品平行處理6份,，測定結(jié)果的RSD<3%,，加標(biāo)回收率在94%~109%之間,。

本方法操作快速簡便,，樣品前處理簡單，可以滿足細(xì)胞培養(yǎng)液中多元素含量的測定要求,。

基于島津LC-MS/MS和ICPMS開發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)上清液分析平臺,，可以用于細(xì)胞培養(yǎng)基組分含量測定，也可以用于培養(yǎng)基配方優(yōu)化,，還可以用于培養(yǎng)基批間質(zhì)量穩(wěn)定性監(jiān)控,。該技術(shù)可以實現(xiàn)多組分同時檢測，方法簡單,、快速,、易上手。助力國產(chǎn)培養(yǎng)基研發(fā)和質(zhì)控，邁上新臺階,，迎來新發(fā)展,，創(chuàng)造新奇跡！