MALDI-TOF應(yīng)用 | 指尖上的食源性病原體鑒定
導(dǎo)讀
指尖上的食源性病原體鑒定
目前新冠病毒仍在肆虐,,做好個(gè)人的衛(wèi)生防護(hù)非常重要。古人云:病從口入,。意思是疾病多是由食物傳染,。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報(bào)道,每年發(fā)生約5.8億例由食品引起的疾病,,其中約有35萬(wàn)例死亡,。由于食源性細(xì)菌通常通過(guò)攝入受污染的食物進(jìn)行傳播,因此不適當(dāng)?shù)氖澄锾幚砜赡軙?huì)威脅到食物的安全性,。雙手是日常生活中我們與外界接觸多的部位,,也使得手成為病菌傳播的重要中轉(zhuǎn)站。不干凈的手部皮膚上每平方厘米密布著上百萬(wàn)個(gè)細(xì)菌,,因此洗手能很好的去除常見(jiàn)致病菌,。公共衛(wèi)生專家強(qiáng)調(diào),應(yīng)采用肥皂液或洗手液以少量水反復(fù)揉搓后,,在流動(dòng)水下沖洗干凈,。
食源性致病菌
食品致病菌是可以引起食物中毒或以食品為傳播媒介的致病性細(xì)菌,。致病性細(xì)菌直接或間接污染食品及水源,人經(jīng)口感染可導(dǎo)致腸道傳染病的發(fā)生及食物中毒以及畜禽傳染病的流行,。食源性致病菌是導(dǎo)致食品安全問(wèn)題的重要來(lái)源,。常見(jiàn)食品致病菌主要有痢疾桿菌、致病性大腸桿菌,、沙門(mén)氏菌,、霍亂弧菌、蠟樣芽胞桿菌,、布氏桿菌,、副溶血桿菌、單增李斯特菌,、金黃色葡萄球菌等,。
以金黃色葡萄球菌為例,金黃色葡萄球菌是常見(jiàn)的食源性致病菌,,廣泛存在于自然環(huán)境中,。金黃色葡萄球菌在適當(dāng)?shù)臈l件下,能夠產(chǎn)生腸毒素,,引起食物中毒,。近幾年,金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報(bào)道層出不窮,,由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,,金黃色葡萄球菌成為僅次于沙門(mén)氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。
探究指尖上的微觀秘密
受試者在含有胰蛋白大豆瓊脂和5%綿羊血的血瓊脂培養(yǎng)基上輕輕印上5個(gè)手指的指紋,。將血瓊脂平板上的來(lái)自于指紋的細(xì)菌置于5%CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)18至48小時(shí),。然后從培養(yǎng)皿中選擇不同的單一細(xì)菌菌落轉(zhuǎn)移至不同的血瓊脂平板上進(jìn)行純細(xì)菌的培養(yǎng) (圖1) 。
圖1. 細(xì)菌傳代培養(yǎng)
快速鑒定過(guò)程采用島津iDPlus微生物鑒定系統(tǒng),,其工作流程由樣品制備,、質(zhì)譜檢測(cè)和SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定三個(gè)階段組成(圖2)。取瓊脂平板上的單菌落溶解于20μL的20%甲酸溶液中,。將1μL的裂解液點(diǎn)在不銹鋼靶板上,,再點(diǎn)上1μL基質(zhì)溶液。然后,,混合物在室溫下干燥,,使基質(zhì)和分析物分子形成共結(jié)晶。使用MALDI-TOF iDPlus Performance進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè),。將樣品質(zhì)譜圖與SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)中的超級(jí)譜圖進(jìn)行比對(duì)來(lái)進(jìn)行鑒定,。
圖2. iDPlus微生物鑒定流程圖
指尖上都有哪些細(xì)菌?
未洗手的人指紋樣本中發(fā)現(xiàn)了14種微生物 (表1),。其中,,從未洗手的指紋樣品中發(fā)現(xiàn)了蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。這兩種菌屬于疾病控制和預(yù)防中心列出的食源性致病菌,。當(dāng)感染者赤手觸摸或攝入食物時(shí),,這些細(xì)菌很容易被傳播。圖3a和3b顯示蠟樣芽孢桿菌(a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質(zhì)譜圖和細(xì)菌培養(yǎng)形態(tài)圖,。
【重要提醒,!】研究顯示,充分洗手后,,在洗凈手指的指紋樣本中已找不到病原體,。
表1 iDPlus平臺(tái)對(duì)受試者未洗手的指紋樣品微生物鑒定結(jié)果
圖3. 蠟樣芽孢桿菌 (a) 和金黃色葡萄球菌 (b) 的質(zhì)譜圖和細(xì)菌培養(yǎng)形態(tài)圖
“看見(jiàn)”細(xì)菌和“認(rèn)識(shí)”危害的有效手段
隱藏在微觀世界中的各類細(xì)菌幾乎布滿我們?nèi)粘I钪械乃袇^(qū)域,*的隔離和避免接觸是不現(xiàn)實(shí)的,,讓大眾能夠“看見(jiàn)”和充分“認(rèn)識(shí)”細(xì)菌的所在和危害,,可以引起社會(huì)衛(wèi)生觀念的提升和全民健康意識(shí)的提高,科學(xué)儀器就是此間有效的手段,。島津iDPlus Performance結(jié)合SARAMIS數(shù)據(jù)庫(kù)快速可靠地用于未清洗的手指上的微生物鑒定(包括各種食源性病原體)以及洗手后不存在微生物的驗(yàn)證,。正確處理食物和實(shí)施衛(wèi)生管理對(duì)于降低人與人之間傳播感染性病原體的風(fēng)險(xiǎn)非常重要。
友情提示
疫情期間,,建議大家在處理食材前后,、進(jìn)食前、如廁后,、擰鼻涕后,、戴口罩前,以及就醫(yī)和接觸動(dòng)物后及時(shí)洗手,。后提供正確洗手姿勢(shì)供大家參考,,口訣是“內(nèi)、外,、夾,、弓、大,、立,、腕”,謝謝,!