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島津企業(yè)管理(中國)有限公司

實用貼士 | 液相色譜柱的使用

時間:2020-4-23 閱讀:373
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色譜柱

高效液相色譜儀

 

色譜柱是高效液相色譜儀的重要組成部分,,在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用,,是色譜分析的核心部件,對高效液相色譜柱的正確使用不僅能延長色譜柱的使用壽命,,還能有效保證實驗結果,。

 

 

以下簡單介紹液相色譜柱

在使用過程中應當注意的問題

 

01

性能測試

 

新色譜柱使用前,好進行柱的性能測試,,并將結果保存起來,,作為今后評價柱性能變化的參考依據(jù) (柱性能由于所使用的樣品,、流動相、柱溫等條件的差異有所不同,,在測試中需保證方法一致性),。

 

02

流動相的配制

 

液相色譜是通過樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:

 

Ø 流動相對樣品具有一定的溶解能力,,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中),。

Ø 流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學反應,。

Ø 流動相的黏度要盡量小,,以便在使用較長的分析柱時既能得到好的分離效果,同時又降低柱壓,,延長柱子的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度),。

Ø 流動相的物化性質(zhì)與使用的檢測器相適應。

Ø 流動相沸點不要太低,,否則容易產(chǎn)生氣泡,,導致實驗無法進行。

Ø 流動相配制好后,,一定要進行脫氣,,除去溶解在流動相中的微量氣體。

 

03

新色譜柱使用前沖洗步驟

 

1,、首先查看色譜柱的說明書,,注意色譜柱封存的溶劑、推薦流速,、pH值,、大耐受柱壓、及高使用溫度等信息,。

2,、如分析使用的流動相與色譜柱內(nèi)儲存的溶劑混溶,可以直接使用流動相參照色譜柱說明書中推薦的流速,、溫度等條件沖洗色譜柱20倍柱體積以上。如果分析條件使用的流動相與色譜柱內(nèi)儲存的溶劑不混溶,,請選擇與色譜柱內(nèi)儲存溶劑和流動相都混溶的溶劑,,作為置換溶劑,逐步置換到分析使用的流動相,。每次置換均應沖洗色譜柱20倍柱體積以上,。

 

04

日常使用注意事項

 

1、請使用HPLC級別以上的試劑作為流動相,。

2,、流動相要用0.45um孔徑以下的微孔濾膜濾過,。

3、流動相的pH值不能超出色譜柱的適用范圍,。

4,、注意流動相的流動方向要與色譜柱標識的方向一致。

5,、容易滋生微生物的流動相不要存放過久,,要及時換新,以免微生物滋生污染色譜柱,。

6,、色譜柱分析結束后要及時*沖洗。

7,、長時間不用的色譜柱要將流動相置換為色譜柱保存的溶劑,,并兩端用堵頭封死保存。

8,、色譜柱要避免劇烈碰撞,、跌落等。

 

05

流動相流速的選擇

 

因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù),,使用不用的流速可得到不同的柱效,。對于一根特定的色譜柱,要追求柱效,,好使用流速,。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1mL/min,,對于內(nèi)徑4.0mm柱,,流速0.8mL/min為。當選用流速時,,分析時間可能延長,。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間(如使用反相柱時,,可適當增加有機試劑甲醇或乙腈的含量),。

 

液相色譜柱在色譜分析中起著至關重要的角色,是樣品分離的核心,,正確使用色譜柱才能達到更好的理想的分離效果,,提高色譜柱的使用壽命。

 

 

 

島津液相色譜儀LC-40

 

融合“AI”loT”技術的液相色譜儀

診斷精靈&修復精靈

智能判斷流動相中氣泡的存在,,主動排氣,,自動重啟分析序列

流速控制精靈

智能流量控制,流速逐漸增加至柱溫設定值,,保護色譜柱

流動相精靈

儲液盤內(nèi)置傳感器,,實時監(jiān)測流動相剩余量

溶劑配置精靈

自動以任意比例混合流動相,,方便、準確地制備出分析所需流動相

倉溫管控精靈

空氣循環(huán)制冷控溫模塊,,防止熱空氣進入樣品倉形成冷凝水

譜峰解析精靈

小肩縫提取,,共流出峰切割,線性范圍拓展

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