導(dǎo)語：
本研究亮點(diǎn)
將含43.8 %蛋白質(zhì)的黃金藻突變體A4-1破壁藻粉(DAP)與SPI以5% DAP+95%SPI的質(zhì)量比在高水分?jǐn)D壓(HME)過程中結(jié)合：
口感：擠出物彈性提升210.6%,，嚼勁度增加141.7%，硬度降低19.36%,。
結(jié)構(gòu)：三維結(jié)構(gòu)纖維豐富,，二級(jí)結(jié)構(gòu)中α-螺旋的比例顯著增加，結(jié)合水含量顯著提高,。
消化：體外模擬消化性顯著提高了37.6 %,，同時(shí)減少了擠出物的苦味和澀味。
菌株背景
突變體A4-1：通過常壓室溫等離子體(ARTP)誘變技術(shù),，從野生型Auxenochlorella pyrenoidosa中篩選出的黃金色突變株,。
核心優(yōu)勢(shì)：與綠色野生型 (WT) 菌株相比，在暗培養(yǎng)中的 A4-1 突變體呈黃色,，葉綠素 a 減少 118 倍,，未檢測(cè)到葉綠素 b。蛋白質(zhì) (44.22 % DW),、總氨基酸 (AAs,，34.84 % DW) 和必需 AA (17.50 % DW) 的含量高，與 WT 相比分別增加了 31 % ,、 22 % 和 30 % (p < 0.05),。
技術(shù)亮點(diǎn)：生物培養(yǎng)過程在線檢測(cè)儀(BODS)
全自動(dòng)智能發(fā)酵
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發(fā)酵條件
初始細(xì)胞密度為1×10^8個(gè)細(xì)胞/mL；pH值6.5,，通過添加1.0 mol/L硝酸并補(bǔ)充氮源來控制;溫度30℃,；攪拌速度80 r/min；初始通氣速率1.5 L/min,。在同一條件下進(jìn)行平行發(fā)酵測(cè)試,，分別使用氯化銨(1.52 g/L)或尿素（1.1 g/L）作為氮源，與上述以硝酸鈉為氮源的發(fā)酵中氮摩爾濃度相同。
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過程監(jiān)測(cè)
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實(shí)時(shí)監(jiān)控
如圖1A和B所示,，細(xì)胞密度和生物量濃度持續(xù)增加，并在大約72到84小時(shí)進(jìn)入穩(wěn)定期,。
通過BODS自動(dòng)檢測(cè)和控制補(bǔ)料,，按照工藝對(duì)過程中葡萄糖濃度進(jìn)行控制，氮濃度通過補(bǔ)料維持在494 ± 53 mg/L范圍內(nèi)（圖1D）,。
如圖1E所示,，使用氯化銨作為氮源時(shí)，蛋白質(zhì)含量(干重43.3%)和生產(chǎn)力（1.31克/升/天）高,，而碳水化合物含量（干重24.1%）和總脂質(zhì)含量（干重13.8%）低,。
核心發(fā)現(xiàn)：微藻粉如何重塑植物肉
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結(jié)構(gòu)升級(jí)
微觀3D網(wǎng)絡(luò)：掃描電鏡顯示，5% DAP使擠壓物形成類動(dòng)物肌肉纖維結(jié)構(gòu),，孔隙均勻,。
水分鎖定：低場(chǎng)核磁共振(LF-NMR)證實(shí)，DAP添加使結(jié)合水比例提升,，增強(qiáng)產(chǎn)品保水性,。5%的DAP摻入顯示出最高的固定水比例(83.70 %)。結(jié)合水的增加通常與水分活度呈負(fù)相關(guān),，從而抑制微生物生長,。自由水含量直降62%，減少水分流失,。
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風(fēng)味優(yōu)化
創(chuàng)新與展望
本研究介紹了一種新策略，利用來自葉綠素合成缺陷型蛋白核小球藻突變體(A 4-1菌株)的破壁藻粉(DAP),，不僅消除了傳統(tǒng)藻類生物質(zhì)的綠色和異味限制,，在高水分?jǐn)D壓條件下還協(xié)同增強(qiáng)了基于SPI的肉類類似物的結(jié)構(gòu)完整性以及生物可及性。DAP有助于蛋白質(zhì)在擠出冷卻過程中多肽鏈的重新排列,，顯著提高了210.6 %的彈性,，結(jié)合水比例的增加也增強(qiáng)了蛋白質(zhì)凝膠的穩(wěn)定性，并促進(jìn)了蛋白質(zhì)纖維的形成,，這是植物基肉類產(chǎn)品品質(zhì)優(yōu)化的一個(gè)突破,。
未來可繼續(xù)探索綠藻缺陷突變體(A4-1菌株)在工業(yè)條件下大規(guī)模微藻發(fā)酵生產(chǎn)中的發(fā)酵性能以及氯化銨在蛋白質(zhì)合成中表現(xiàn),，以及藻類成分在調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)-大分子相互作用中的具體作用機(jī)制。
關(guān)于BODS
生物培養(yǎng)過程在線檢測(cè)儀（Bioreaction Online Detection System, BODS）是一種對(duì)生物反應(yīng)器進(jìn)行全自動(dòng)在線取樣,、處理,、檢測(cè)和留樣的儀器。多種檢測(cè)模塊集成,，可實(shí)時(shí)顯示罐內(nèi)生物量,、底物消耗和產(chǎn)物生成情況，也可及時(shí)調(diào)節(jié)反饋控制系統(tǒng),，實(shí)現(xiàn)底物的精確控制流加,，提高發(fā)酵過程控制效率，為發(fā)酵過程優(yōu)化和工藝放大提供強(qiáng)有力的數(shù)據(jù)支撐,。
關(guān)于我們
天木生物專注于生物育種領(lǐng)域的儀器裝備的開發(fā)與應(yīng)用,，致力于通過高效的突變技術(shù)和高通量篩選技術(shù)，改造提升產(chǎn)業(yè)傳統(tǒng)菌種開發(fā)模式,，為生物制造產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效,，提升我國生物產(chǎn)業(yè)的核心競爭力。 致力于為行業(yè)“細(xì)胞和菌種開發(fā)與篩選效率低",、“相關(guān)裝備成本昂貴"、“產(chǎn)業(yè)化落地困難"等難題提供優(yōu)秀的解決方案,。
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