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廣州同譜實(shí)驗(yàn)儀器有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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廣州同譜實(shí)驗(yàn)儀器有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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2020-12-16 閱讀(2798)
應(yīng)用簡(jiǎn)介
本實(shí)驗(yàn)采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜串聯(lián)熒光檢測(cè)器（SPE-HPLC) 的方法，建立了香油中苯并芘殘留量的檢測(cè)方法,。香油經(jīng)正己烷溶解，Cleanert Silica和Cleanert BAP-3固相萃取柱凈化,，Venusil ASB C18色譜柱（4.6 × 250 mm,，5 μm，150 Å）分離,，水和乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫,，外標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明,，苯并芘添加量為0.1 mg/kg時(shí),，回收率在80% ~ 100%之間，能夠滿足檢測(cè)要求,。——應(yīng)用編號(hào)：AF10098
苯并芘又稱苯并（α）芘,，英文縮寫B(tài)aP，是一種常見(jiàn)的高活性間接致癌物和突變?cè)?。BaP存在于煤焦油,、各類炭黑和煤、及焦化,、煉油,，瀝青、塑料等工業(yè)污水中,。肉和魚(yú)中的BaP含量取決于烹調(diào)方法,，水果、蔬菜和糧食中的BaP含量取決其來(lái)源,。主要來(lái)自洗刷大氣的雨水水中的BaP以吸附于某些顆粒上,、溶解于水中和呈膠體狀態(tài)等三種形式存在，其中大部分吸附在顆粒物質(zhì)上,。BaP被認(rèn)為是高活性致癌劑,，但并非直接致癌物，必須經(jīng)細(xì)胞微粒體中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性,。BaP不僅廣泛存在于環(huán)境中,，而且與其它多環(huán)芳烴的含量不一定的相關(guān)性，長(zhǎng)期生活在含BaP的空氣環(huán)境中會(huì)造成慢性中毒,。許多國(guó)家的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,，BaP具有致癌、致畸,、致突變性,。危險(xiǎn)特性，遇明火,、高熱可燃,。受高熱分解放出有毒的氣體因此通過(guò)有效的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段，對(duì)香油中的有關(guān)苯并芘殘留進(jìn)行監(jiān)控,，以確保消費(fèi)者對(duì)食品消費(fèi)的安全具有重要意義,。
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)優(yōu)化前處理方法建立了苯并芘在香油中的高效液相色譜方法。
實(shí)驗(yàn)部分
儀器,、試劑與材料
主要儀器設(shè)備
高效液相色譜儀（配熒光檢測(cè)器）
試劑材料
正己烷,、二氯甲烷,、乙腈均為色譜純；實(shí)驗(yàn)用水為超純水,；苯并芘標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%）；一次性無(wú)菌注射器,；針式過(guò)濾器PTFE(0.22 μm,，直徑13 mm)；
Cleanert Silica固相萃取柱柱：500 mg/6 mL（貨號(hào)：SI5006）,；Cleanert BAP-3固相萃取柱柱：500 mg/6 mL （貨號(hào)：Bap5006）
樣品制備
樣品處理
稱取香油0.5 g,，置于12 mL樣品瓶中，加入3 mL正己烷,，渦旋震蕩溶解,，作為待凈化液。
樣品凈化
取Cleanert BAP-3萃取柱(500 mg/6 mL),，需在柱上串聯(lián)一只Cleanert Silica固相萃取柱,，依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化小柱,；將上述待凈化液上樣到小柱上,，然后用2 mL正己烷潤(rùn)洗樣品瓶，將潤(rùn)洗液也上樣到柱上,，先用5 mL正己烷淋洗串聯(lián)柱,，待溶液*滴至Cleanert BAP-3上，將Silica硅膠柱棄去,，再用5 mL正己烷淋洗Cleanert BAP-3柱,，棄去淋洗液；后用5 mL二氯甲烷洗脫,，收集,；40℃氮?dú)獯蹈上疵撘海? mL乙腈溶解定容,，超聲10 s,，過(guò)0.22 μm PTFE濾膜后進(jìn)HPLC檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)條件：液相條件
色譜柱：Venusil ASB C18,，5 μm,，150 Å，4.6 × 250 mm
流動(dòng)相：水︰乙腈= 12︰88
柱 溫：30℃
進(jìn)樣量：20 μL
流 速：1.0 mL/min
發(fā)射波長(zhǎng)：406 nm,；激發(fā)波長(zhǎng)：384 nm
結(jié)果與討論
由表1可知,，采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜法檢測(cè)苯并芘的加標(biāo)回收率在80% ~100%之間，CV值小于10%,，能夠滿足檢測(cè)要求,。由圖可看出經(jīng)Cleanert Silica串聯(lián)Cleanert BAP-3柱凈化,，采用Venusil ASB C18色譜柱檢測(cè)得到的苯并芘峰形良好，且保留時(shí)間穩(wěn)定,。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表1. 香油中苯并芘實(shí)驗(yàn)結(jié)果
物質(zhì)名稱 | 加標(biāo)量/(mg/kg) | 平均回收率/% | CV/% | RT/min |
苯并芘 | 0.1 | 90.2 | 2.2 | 8.41 |
結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)建立了香油中苯并芘殘留量的前處理方法,，并結(jié)合高效液相色譜對(duì)香油中苯并芘的殘留量進(jìn)行了測(cè)定。對(duì)于加標(biāo)量為0.1 mg/kg的樣品進(jìn)行了檢測(cè),，回收率在80% ~ 100%之間,，符合要求。
附：相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格描述 | 包裝數(shù)量 | 訂貨號(hào) |
Venusil ASB C18 | 5µm,，150Å,，4.6×250mm | 1支 | VS952505-0 |
Cleanert BAP-3 | 500mg/6mL | 30支/pk | Bap5006 |
Cleanert Silica | 500mg/6mL | 30支/包 | SI5006 |
保護(hù)柱套 | 適用于4.6*10mm和2.1*10mm | 1支 | SH-100 |
直聯(lián)式保護(hù)柱芯 | 5µm，150Å,；4.6*10mm | 4支/包 | VS950105-0S |
1.5 mL樣品瓶 | 短螺紋透明帶書寫處 32*11.6mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 mL樣品瓶蓋 | 9mm中心孔藍(lán)蓋,，紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm | 100/pk | 0915-1819 |
針式過(guò)濾器PTFE | 單膜，13mm,，0.22µm | 100個(gè)/包 | AS041320-T |
一次性注射器 | 2 mL無(wú)針頭 | 100支/包 | LZSQ-2ML |
正己烷 | 4 L/瓶,，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH216-4 |
二氯甲烷 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH300-4 |
乙腈 | 4 L/瓶,，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH015-4 |
SPE-M08正壓型多功能固相萃取裝置 | 8 通道 | 1 臺(tái) | SPE-M08 |
15位氮吹儀 | 15位 | 1 臺(tái) | NV15-M |
