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黃曲霉B1快檢方法

2017-8-15 閱讀(3013)

【產(chǎn) 品 簡 介】 黃曲霉B1(Aflatoxin B1簡寫為AFB1)是目前已知的化學物質(zhì)中致癌性zui強的一種,。黃曲霉B1對人和若干動物具有強烈的毒性,,其毒性作用主要是對肝臟的損害,。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項目之一。本品的檢測靈敏度為5ng/ml(5ppb)。
【檢 測 原 理】 本品采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術(shù),通過單克隆抗體競爭結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標記的抗AFB1單克隆抗體,。
【樣 品 制 備】 1.谷物:任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,準確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,,再準確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm離心1min得上清液,,將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,,用電吹風吹干上清液,再根據(jù)樣品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量,,用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復沖洗,,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液,??紤]不同樣品對黃曲霉B1的zui高含量要求,請參考下表進行用稀釋液溶解杯底固體:
谷物殘留*(ppb)
2.5
5
10
20
使用稀釋液體積(ml)
0.4
0.8
1.6
3.2
2.飼料(以殘留*50ppb計算):任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,,準確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,,再準確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,,充分振蕩5min,,4000rpm離心1min得上清液,將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,,用電吹風吹干上清液,,再以2ml的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復沖洗,*溶解杯底所有的固體,,此溶解液為樣品提取液即檢測液,。如果殘留*是30ppb,則用1.2ml的稀釋液溶解,;如果殘留*是40ppb,,則用1.6ml的稀釋液溶解。
3.食用油:稱2.0g油樣于小燒杯中,,用8ml正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,,準確加入4ml純凈水充分振蕩3min,吸去上層正乙烷層,,再加入4ml的乙酸乙酯,,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,,靜置或3000rpm離心得上清液,,將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中,用電吹風吹干,,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4.醬油,、醋,、發(fā)酵酒:稱取25.0g樣品于小燒杯中,用5ml蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入20ml三氯*烷,,加塞輕輕振搖3min,,靜置分層。放出下層三氯*烷層,,經(jīng)盛有約5g預先用三氯*烷濕潤的無水Na2SO4過濾器于蒸發(fā)皿中,,zui后用少量三氯*烷洗滌過濾器,洗液并于蒸發(fā)皿中,,用電吹風吹干,。吹干冷卻后,準確加入稀釋液,,將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解,。
【檢 測 步 驟】 1. 在進行檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復至室溫,;
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,,打開后平放在桌面上,請在1小時內(nèi)盡快使用,;
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,,滴加3滴于加樣孔中,加樣后開始計時,;
4. 結(jié)果應在10min內(nèi)讀取,,超過12min的時間判讀無效。

【結(jié) 果 判 定】 1.陽性:位置C顯示出紅色線條,,而位置 T不顯色時,,或者位置C顯示出紅色線條,位置 T顯示顏色非常模糊時,,判為陽性,。陽性結(jié)果表明:AFB1含量超過樣品允許量。
2.陰性:位置C顯示出紅色線條,,位置 T同時顯示出紅色線條,,且T線顏色接近C線或者深于C線時,判為陰性,。陰性結(jié)果表明:AFB1含量低于樣品允許量,。
3.無效:位置C不顯示出紅色線條,而位置 T顯示出紅色線條,,該試紙卡視為無效,。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。
【注 意 事 項】 1.請按照操作步驟進行測試,,操作時請勿觸摸試紙顯示區(qū),。
2.如購買時發(fā)現(xiàn)過期,,破損,污染,,無效的產(chǎn)品,,請到購買處進行更換。
3.本品為一次性產(chǎn)品,,請勿重復使用,。
4.如遇稀釋液不足,請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用,。
5.本品為篩選試劑,,任何陽性結(jié)果請用其他方法做進一步確認。
6.有條件的實驗室可以用AFB1標準品測試后作為判斷參考,。
【儲藏條件與有效期】本品應保存在干燥陰涼處(4--30℃),,有效期18個月。
【配 置 清 單】
【備 注】 本產(chǎn)品僅適用于疑似問題食品的初篩,,檢測結(jié)果不具有法律效力,,不能作為執(zhí)法依據(jù)。



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