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COD光度計讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實驗者最頭痛的問題,。靈敏度越高的儀器,，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。事實上,，COD光度計的設(shè)計原理和工作原理,，允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化，即COD光度計有一定的準(zhǔn)確度和精確度,。

1,、核酸本身物化性質(zhì)

溶解核酸的緩沖液的pH值、離子濃度等在測試時,，離子濃度太高也會導(dǎo)致讀數(shù)漂移,，因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液(如TE)可大大穩(wěn)定讀數(shù),。核酸的吸光值受pH值和緩沖液離子濃度影響,。只有在一定的pH值和低離子濃度的條件下(如10mMTris-HClpH8.0)，才能得到精確的檢測結(jié)果。水的pH值不穩(wěn)定,，可能導(dǎo)致檢測誤差,。一些緩沖液在紫外范圍內(nèi)存在自身吸收，為了確保準(zhǔn)確測量,，請使用與懸浮或洗脫樣品時相同的緩沖液,。

2、樣品的稀釋濃度

樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素,，由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒,，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果,。為了減少顆粒對測試結(jié)果的影響,，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A,。在此范圍內(nèi),，顆粒的干擾相對較小，結(jié)果穩(wěn)定,。從而意味著樣品的濃度不能過低,，或者過高(超過光度計的測試范圍)。

3,、光度計操作因素

如混合要充分,，否則吸光值太低,，甚至出現(xiàn)負(fù)值;混合液不能存在氣泡，空白液無懸浮物,，否則讀數(shù)漂移劇烈;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品,，否則濃度差異太大;換算系數(shù)和樣品濃度單位選擇一致;不能采用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必須達(dá)到比色杯要求的最小體積等多個操作事項。