液相色譜儀是一種常用的色譜儀器，利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,，對混合物進(jìn)行先分離,，具有、快速,、靈敏等優(yōu)點(diǎn),。今天小編主要來介紹一下液相色譜儀的系統(tǒng)組成部件，希望可以幫助到大家,。
液相色譜儀的系統(tǒng)組成部件
液相色譜儀系統(tǒng)由儲液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),，在兩相中作相對運(yùn)動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時,，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,，液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng),、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
進(jìn)樣系統(tǒng)
一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,，進(jìn)樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
輸液系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括高壓泵,、流動相貯存器和梯度儀三部分,。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47～4.4X10Pa,，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時,，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率,、回收樣品,、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀,，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,，包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度,、PH值,，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團(tuán)的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離,。
分離系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm(需要兩根連用時,，可在二者之間加一連接管),，內(nèi)徑為2～5mm，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成).固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,，它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達(dá)1000?)和比表面積大的特點(diǎn),，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基,、羥甲基,、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機(jī)化合物,。因此，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性,。例如,，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后，就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來,。
另外,，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達(dá)到均勻,、致密狀態(tài),，極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng),。基質(zhì)粒度小,，微孔淺,，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度,、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小,，塔板理論數(shù)N就越大,。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小，會提高分辨率的道理,。
再者,，液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C，通過改善傳質(zhì)速度,，縮短分析時間,，就可增加層析柱的效率。
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