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中壓制備色譜的操作方法介紹

閱讀:1336      發(fā)布時(shí)間:2023-4-7
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  中壓制備色譜是一種廣泛應(yīng)用于藥物,、化學(xué),、食品等領(lǐng)域的分離純化技術(shù),。其作用是對(duì)復(fù)雜混合物進(jìn)行分離純化,,從中得到目標(biāo)化合物。
  中壓制備色譜可用于分離純化天然產(chǎn)物,、合成物或混合物,。其作用是將復(fù)雜的混合物分離成單一化合物或純化化合物。與其他分離方法相比,,中壓制備色譜具有分離效率高,、選擇性好、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),,因此被廣泛應(yīng)用于藥物,、化學(xué)、食品等領(lǐng)域,。
  分離原理是根據(jù)化合物在不同穩(wěn)定相(固體或液體)中的分配行為,,通過(guò)它們與固定在柱上的特定填料的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)。填料具有不同的親和性,,可以選擇性地吸附或排除不同化合物,,以實(shí)現(xiàn)分離和純化目的。常用的填料有硅膠,、OCTADECYL硅膠,、石墨碳和氮化硅(C18)等,。
  中壓制備色譜的操作方法:
  1.前處理
  樣品準(zhǔn)備:為了得到準(zhǔn)確的色譜分析結(jié)果,樣品必須具有高度純度,?;旌衔锟梢酝ㄟ^(guò)提取、分離和純化等方法進(jìn)行前處理,。
  溶劑選擇:在進(jìn)行色譜分析之前,,必須選擇合適的流動(dòng)相。通常用于中壓制備色譜中的流動(dòng)相是有機(jī)溶劑(如甲醇,、乙醇,、醚等)和水的混合物。
  2.柱選擇與填料選擇
  柱選擇:柱是中壓制備色譜的核心部分,。對(duì)于中壓制備色譜,,通常選擇內(nèi)徑較大的柱(10-50mm)。
  填料選擇:常用的填料有硅膠,、OCTADECYL硅膠,、石墨碳和C18等。選擇填料應(yīng)根據(jù)化合物的極性和化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行,。
  3.裝柱和校準(zhǔn)
  裝柱:將選好的填料放入柱中,,使之均勻分布。
  校準(zhǔn):根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的流動(dòng)相和溫度等條件,,確定最佳分離條件,。
  4.色譜分離實(shí)驗(yàn)
  將樣品溶液加入柱中,通過(guò)未固定的化學(xué)互作用,,使其分離成單一或純凈化合物,。同時(shí),記錄樣品進(jìn)入柱和流經(jīng)柱的時(shí)間,,并根據(jù)判斷溶液進(jìn)出時(shí)間的間隔來(lái)評(píng)估分離效果,。

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