高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā),、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物,。
使用高效液相色譜時(shí),,液體待檢測物被注入色譜柱,,通過壓力在固定相中移動(dòng),由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,,通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì),。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,,廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。
高效液相色譜跑梯度如何平衡基線,?
首先,當(dāng)梯度完成時(shí),,基線漂移是正常的,,但是基線漂移的嚴(yán)重性可以通過以下措施來改善:
1.梯度前,最好用純有機(jī)溶劑沖洗高效液相色譜柱,,或使用新高效液相色譜柱,,以防止高效液相色譜柱中的殘留物導(dǎo)致基線漂移。
2.試劑純度優(yōu)選為普通色譜純試劑,。如果純度不夠,,梯度過程中也會(huì)出現(xiàn)基線漂移。
3.控制室或柱溫,,防止溫度波動(dòng)
4.注射前,,進(jìn)行溶劑空白試驗(yàn)。如果基線漂移嚴(yán)重,,可使用該空白進(jìn)行扣除,,基線漂移將得到改善。
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