高效液相色譜法的發(fā)展歷史
1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,,為了分離蛋白質(zhì),、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭(Kirkland),、哈伯、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯,、里普斯克等人開發(fā)了世界一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代,。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,,提高色譜柱的塔板數(shù),以高壓驅(qū)動流動相,,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成,。1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書,標(biāo)志著高效液相色譜法(HPLC)正式建立,。在此后的時間里,,高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測手段,在有機化學(xué),、生物化學(xué),、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測,、化工,、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測,、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用,。高效液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù),、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展,。1960年代前,使用的填充粒大于100μm,,提高柱效面臨著困境,,后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸??瓶颂m,、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相,這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,,實現(xiàn)了高速傳質(zhì),,為高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展奠定了穩(wěn)固的基礎(chǔ),。隨著填料粒徑的降低,更高的柱效也得以實現(xiàn),。1960年代研制出氣動放大泵,、注射泵及低流量往復(fù)式柱塞泵,但后者的脈沖信號很大,,難以滿足高效液相色譜的要求,。1970年代,往復(fù)式雙柱塞恒流泵,,解決了這一問題,。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠,平均粒徑只有7μm,,具有好的柱效,,并逐漸取代了無定形微粒硅膠。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩(wěn)定性大為提高,,多次使用成為可能,。1970年后,適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點,。1980年后,,改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題,,人們越來越認(rèn)識到改變流動相的組成事提高選擇性的關(guān)鍵,。
北京創(chuàng)新通恒科技有限公司是一家致力于分離技術(shù)研究及應(yīng)用的高科技企業(yè)。從2000年成立之日起,,創(chuàng)新通恒人本著銳意創(chuàng)新,,不斷進取的精神,秉承“以液相色譜技術(shù)為核心,,不斷拓展應(yīng)用領(lǐng)域,,滿足客戶不同需求“的企業(yè)發(fā)展宗旨,攻克了一個又一個技術(shù)難關(guān),,在色譜產(chǎn)品領(lǐng)域,,成為國內(nèi)較大的研究、制造企業(yè)之一,。產(chǎn)品包括實驗室高效液相色譜系統(tǒng),、中試型制備液相色譜系統(tǒng)、生產(chǎn)型工業(yè)化制備液相色譜系統(tǒng),;產(chǎn)品線貫穿醫(yī)藥,、化工領(lǐng)域內(nèi),質(zhì)檢,、研發(fā),、規(guī)?;a(chǎn)的整個過程。在提供全套硬件設(shè)備的同時,,創(chuàng)新通恒還擁有分離純化工藝研究的中試車間,,可向客戶提供整體解決方案。
高效液相色譜儀的應(yīng)用
高效液相色譜法適于分析高沸點不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定易分解的,、分子量大、不同極性的有機化合物,;生物活性物質(zhì)和多種天然產(chǎn)物,;合成的和天然的高分子化合物等。
食品是人類生活中*的必需品,,是人類生命活動能量的來源,。食品種類繁多,各種食品具有不同的特性和營養(yǎng)成分,,它所包含的糖,、有機酸、維生素,、氨基酸等直接關(guān)系到人體的健康,。在食品生產(chǎn)過程中,往往需要添加防腐劑,、抗氧化劑,、人工合成色素、甜味劑,、保險劑等化學(xué)物質(zhì),,它們的含量過高就會危害人體健康。此外由于環(huán)境污染,,也會使食品沾染有害的微量元素,、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等,。
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