高效液相色譜法的發(fā)展歷史
1960年代,,由于氣相色譜對(duì)高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性,為了分離蛋白質(zhì),、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),,氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland),、哈伯,、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界一臺(tái)高效液相色譜儀,,開啟了高效液相色譜的時(shí)代,。高效液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),,以高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實(shí)踐》一書,,標(biāo)志著高效液相色譜法(HPLC)正式建立,。在此后的時(shí)間里,高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測(cè)手段,,在有機(jī)化學(xué),、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué),、藥物開發(fā)與檢測(cè),、化工、食品科學(xué),、環(huán)境監(jiān)測(cè),、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜同時(shí)還極大的刺激了固定相材料,、檢測(cè)技術(shù),、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。1960年代前,,使用的填充粒大于100μm,,提高柱效面臨著困境,后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸,??瓶颂m、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相,,這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,,實(shí)現(xiàn)了高速傳質(zhì),為高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展奠定了穩(wěn)固的基礎(chǔ),。隨著填料粒徑的降低,,更高的柱效也得以實(shí)現(xiàn)。1960年代研制出氣動(dòng)放大泵,、注射泵及低流量往復(fù)式柱塞泵,,但后者的脈沖信號(hào)很大,難以滿足高效液相色譜的要求。1970年代,,往復(fù)式雙柱塞恒流泵,,解決了這一問題。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠,,平均粒徑只有7μm,,具有好的柱效,并逐漸取代了無定形微粒硅膠,。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩(wěn)定性大為提高,,多次使用成為可能。1970年后,,適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點(diǎn),。1980年后,改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題,,人們?cè)絹碓秸J(rèn)識(shí)到改變流動(dòng)相的組成事提高選擇性的關(guān)鍵,。
北京創(chuàng)新通恒科技有限公司是一家致力于分離技術(shù)研究及應(yīng)用的高科技企業(yè)。從2000年成立之日起,,創(chuàng)新通恒人本著銳意創(chuàng)新,,不斷進(jìn)取的精神,秉承“以液相色譜技術(shù)為核心,,不斷拓展應(yīng)用領(lǐng)域,,滿足客戶不同需求“的企業(yè)發(fā)展宗旨,攻克了一個(gè)又一個(gè)技術(shù)難關(guān),,在色譜產(chǎn)品領(lǐng)域,,成為國內(nèi)較大的研究,、制造企業(yè)之一,。產(chǎn)品包括實(shí)驗(yàn)室高效液相色譜系統(tǒng)、中試型制備液相色譜系統(tǒng),、生產(chǎn)型工業(yè)化制備液相色譜系統(tǒng),;產(chǎn)品線貫穿醫(yī)藥、化工領(lǐng)域內(nèi),,質(zhì)檢,、研發(fā)、規(guī)?;a(chǎn)的整個(gè)過程,。在提供全套硬件設(shè)備的同時(shí),創(chuàng)新通恒還擁有分離純化工藝研究的中試車間,,可向客戶提供整體解決方案,。
高效液相色譜儀的應(yīng)用
高效液相色譜法適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定易分解的、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物,;生物活性物質(zhì)和多種天然產(chǎn)物;合成的和天然的高分子化合物等,。
食品是人類生活中*的必需品,,是人類生命活動(dòng)能量的來源。食品種類繁多,,各種食品具有不同的特性和營(yíng)養(yǎng)成分,,它所包含的糖、有機(jī)酸,、維生素,、氨基酸等直接關(guān)系到人體的健康。在食品生產(chǎn)過程中,,往往需要添加防腐劑,、抗氧化劑、人工合成色素,、甜味劑,、保險(xiǎn)劑等化學(xué)物質(zhì),它們的含量過高就會(huì)危害人體健康,。此外由于環(huán)境污染,,也會(huì)使食品沾染有害的微量元素、農(nóng)藥殘留,、獸藥殘留等,。
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