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上海EMSA實(shí)驗(yàn)

EMSA實(shí)驗(yàn)是凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)（EMSA）是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù)，可用于定性和定量分析,。這一技術(shù)初用于研究DNA結(jié)合蛋白,，目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNA或RNA探針一同保溫,，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,，分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針,。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動(dòng)得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,，可是雙鏈或者是單鏈,。

當(dāng)檢測(cè)如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白,，部分純化蛋白,，或核細(xì)胞抽提液。在檢測(cè)RNA結(jié)合蛋白時(shí),，依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質(zhì)細(xì)胞抽提液,。競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA的片段和寡核苷酸片段（特異）,，和其它非相關(guān)的片段（非特異），來(lái)確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性,。在競(jìng)爭(zhēng)的特異和非特異片段的存在下,，依據(jù)復(fù)合物的特點(diǎn)和強(qiáng)度來(lái)確定特異結(jié)合。

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樣本保存及運(yùn)輸：蛋白和組織樣本-80℃保存,，防止蛋白降解,，每張膜可做1-8個(gè)樣本。

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