日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

TA克隆

TA克隆方法（TA Cloning）：把PCR片斷與一個具有3-T突出的載體DNA連接起來的方法,。因為PCR反應中所適用的聚合酶具有末端轉(zhuǎn)移的活性,，通常在3加上A。例如：Taq聚合酶同時具有的末端連接酶的功能,，PCR反應時在每條PCR擴增產(chǎn)物的3端自動添加一個3-A突出端,。只有用經(jīng)過特殊處理的具有3-T突出末端的DNA的片斷才能通過T/A配對進行連接。

通過PCR的方法擴增目的基因片斷的過程中,，由于往往不清楚目的基因的DNA序列,，獲得的目的片斷通常需要通過TA克隆的方法，重組到T-載體中,，通過序列測定清楚DNA序列,。由于在PCR過程中，使用的DNA聚合酶不同,，往往分為2種情況：（1）使用不同的Taq酶,，在PCR擴增循環(huán)結(jié)束后，加上72℃ 10分鐘一個過程,，Taq酶可以在擴增產(chǎn)物的3末端加上A,，因此PCR產(chǎn)物回收純化后可以和T載體直接連接。（2）使用高保真的DNA聚合酶,，如pfu酶,，由于其不能在擴增產(chǎn)物的3末端加上A,，得到的DNA序列為鈍端，因此,，需要在回收純化后進行加A的過程,，通常是以PCR回收產(chǎn)物為模板，加上量的普通Taq酶和反應液,，加入dATP（或dNTP）,，72℃10分鐘，然后將加A產(chǎn)物直接用于TA連接,。

TA克隆實驗材料要求：未純化的PCR產(chǎn)物及PCR電泳圖片,，PCR擴增引物序列PCR擴增用酶，如果使用含3'→5'外切酶活性的聚合酶,，請?zhí)峁㏄CR引物,，我們將重新擴增PCR產(chǎn)物以能進行TA克隆操作。

TA克隆服務(wù)說明 
1,、PCR產(chǎn)物TA克隆實驗中,，PCR片段越大，TA克隆難度越大,；2,、TA克隆實驗中，我們使用的是大家常用 T載體作為標準T載體,，如果對載體有特殊要求,，請再實驗之前告知客戶服務(wù)人員。

如果您對我們的TA克隆感興趣或有疑問,