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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)
iTRAQ和tmt的技術(shù)原理一樣,所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異,。與SILAC相比(標(biāo)記蛋白質(zhì)),,iTRAQ和TMT是對(duì)肽段進(jìn)行標(biāo)記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異,,通過MS實(shí)現(xiàn)對(duì)多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對(duì)定量:
SILAC是通過一級(jí)MS( MSl)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量,,而iTRAQ/TMT是通過二級(jí)MS( MS/MS.MS2)進(jìn)行定量的iTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質(zhì)樣品,并且能同時(shí)分析多達(dá)8-10組的樣品,,分析通量高。
1,、分別提取蛋白質(zhì)并定量,;
2、Trypsin分別對(duì)蛋白進(jìn)行酶解,,提取肽段,;
3、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/TMT標(biāo)簽分別對(duì)肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記:
4,、標(biāo)記完成后,,混合樣品,用SCX進(jìn)行組分分離(15-20組分),;
5,、對(duì)每個(gè)組分進(jìn)行LC-MS分析:
6、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析,,篩選差異表達(dá)的蛋白,;
7、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證(Western blot,,EUSA等):
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1,、高通量,,能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)8-10組樣品蛋白質(zhì)組的定性與定量分析;
2,、兼容來源的樣品(動(dòng)植物組織,、細(xì)菌、血液等),;
3,、實(shí)驗(yàn)周期短。
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