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TMT

iTRAQ和TMT的技術(shù)原理一樣，所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異,。與SILAC相比（標(biāo)記蛋白質(zhì)）,，iTRAQ和
是對(duì)肽段進(jìn)行標(biāo)記的。依據(jù)iTRAQ/標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異,，通過(guò)MS實(shí)現(xiàn)對(duì)多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對(duì)定量：
SILAC是通過(guò)一級(jí)MS( MSl)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量,，而iTRAQ/是通過(guò)二級(jí)MS( MS/MS．MS2)進(jìn)行定量的j
iTRAQ/能兼容來(lái)源的蛋白質(zhì)樣品，并且能同時(shí)分析多達(dá)8-10組的樣品,，分析通量高,。

1、分別提取蛋白質(zhì)并定量,；
2,、Trypsin分別對(duì)蛋白進(jìn)行酶解，提取肽段,；
3,、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/標(biāo)簽分別對(duì)肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記：
4、標(biāo)記完成后,，混合樣品,，用SCX進(jìn)行組分分離（15-20組分）；
5,、對(duì)每個(gè)組分進(jìn)行LC-MS分析：
6,、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析，篩選差異表達(dá)的蛋白,；
7,、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證（Western blot，EUSA等）：

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

1,、高通量,，能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)8-10組樣品蛋白質(zhì)組的定性與定量分析；

2,、兼容來(lái)源的樣品（動(dòng)植物組織,、細(xì)菌,、血液等）；

3,、實(shí)驗(yàn)周期短,。

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