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免疫熒光組化操作流程 (石蠟切片)

2015-5-5  閱讀(1846)

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【詳細(xì)說明】

免疫熒光組化操作流程 (石蠟切片)

1,、3μm石蠟切片貼在涂有切片粘合劑的干凈載玻片上,57℃烤4-18h;

2,、石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,,0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;

3,、抗原修復(fù):0.02mol/L pH6.0 CB(檸檬酸鹽緩沖液),微波98℃(Ⅲ檔)15min,自然冷卻20min;0.4%胃蛋白酶消化40min,at

37℃ ,;

4、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;

5,、加一抗PGP9.5 1:100,; 37℃溫孵2h,

6、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;

7,、加二抗(FITC標(biāo)記) 1:200室溫溫孵2h;

8,、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;

9.蒸餾水洗3min,

10、DAP-I和封片增強(qiáng)劑(Sigma公司)封片;-20℃保存待共聚焦觀察,。




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